Phenylethanolamine ein Serum ELISA Tests Kit For Milk Egg Urine ziehen 96 Wells/Ausrüstung ein

Phenylethanolamine ein ELISA Test Kit For Milk-Ei-Urin-Serum ziehen 96 Wells/Ausrüstung ein

 

1. Prinzip

Die Testausrüstung basiert auf dem wettbewerbsfähigen Enzym Immunoassay für die Entdeckung von Phenylethanolamine A in der Probe. Das konjugierte Antigen wird auf den mikro--gut Streifen vorgalvanisiert. Das Phenylethanolamine A in der Probe und die Kopplungsantigene, die auf den mikro--gut Streifen vorgalvanisiert werden, konkurrieren für anti- Antikörper Phenylethanolamine A. Nachdem der Zusatz des Enzymparonyms, das TMB-Substrat für Färbung hinzugefügt ist. Der Wert der optischen Dichte (Od) der Probe hat eine negative Wechselbeziehung mit der Konzentration Phenylethanolamine A in der Probe. Der Wert wird mit der Standardkurve verglichen und die Konzentration Phenylethanolamine A wird nachher erreicht.

 

2. Technische Spezifikationen

Empfindlichkeit: 0,1 ppb
Brutkastentemperatur: 25℃
Brutkastenzeit: 30min~15min

Nachweisgrenze
Gewebe 0,2 ppb
Ziehen Sie 0,5 ppb ein

Kreuzreaktionen:
Phenylethanolamine A 100%
Wiederfindungsrate <1> Ractopamine <1> Salbutamol <1> Clenbuterol
Gewebe, Zufuhr 85±25%

 

3. Komponenten

 

1	Mikro--gut Streifen	12 Streifen mit 8 entfernbar je Brunnen
2	Standardlösung 6× (1mL jedes)	0ppb	0.1ppb
		0.3ppb	0.9ppb
		2.7ppb	8.1ppb
3	Enzymparonym	7ml	rote Kappe
4	Antikörperfunktionslösung	7ml	blaue Kappe
5	Substrat A	7ml	weiße Kappe
6	SubstrateB	7ml	schwarze Kappe
7	Stoppen Sie Lösung	7ml	gelbe Kappe
8	20× konzentrierte waschenden Puffer	40ml	weiße Kappe
9	2× konzentrierte das Wieder auflösen der Lösung	50ml	transparente Kappe

 

4. Materialien erfordert aber nicht bereitgestellt

1) Ausrüstungen: microplate Leser, Drucker, Homogenisierer, Stickstofftrocknergerät, Oszillator, die Zentrifuge, messend pipettiert, Balance (eine gegenseitige Empfindlichkeit von 0,01 g), Brutkasten.
2) Micropipettors: Einkanal- µL 20-200 µL und 100-1000 und Mehrkanal-µL 30-300;
3) Reagenzien: Ethylacetat, N-Hexan, Eisessig

 

5. Beispielvorbehandlung

Anweisungen (mit die folgenden Punkte müssen vor der Vorbehandlung beschäftigt werden)
1) nur die Wegwerfspitzen können für die Experimente verwendet werden und die Spitzen müssen geändert werden, wenn sie für das Absorbieren von verschiedenen Reagenzien verwendet werden;
2) vor dem Experiment, muss jedes experimentelle Gerät sauber sein und sollte gegebenenfalls wieder-gesäubert werden, um die Verschmutzung zu vermeiden, die die Versuchsergebnisse behindert.

Lösungsvorbereitung vor Beispielvorbehandlung:
1) Probe, die Lösung extrahiert: nehmen Sie Ethylacetat 99ml, addieren Sie 1 ml Eisessig, und mischen Sie es gut.
2) Probe, die Lösung wieder auflöst: das 2×concentrated, das Lösung wieder auflöst, wird mit entionisiertem Wasser am 1:1 (1mL konzentrierte das Wieder auflösen der Lösung + des 1mL entionisierten Wassers), verdünnt, verwendet für Beispieldas wieder auflösen.

Beispielvorbereitung
5,1 Zufuhr
1. nehmen Schleifenprobe, 1.0±0.05g in ein Rohr der Zentrifuge 50ml;
2. addieren Sie 10 ml-Probe, die Lösung, Erschütterung mit Oszillator für Minute 3 extrahiert;
3. Zentrifuge bei 4000 r/min bei Zimmertemperatur für Minute 10;
4. nehmen Sie 2 ml schwimmend, Schlag, um mit Stickstoff oder Luft bei ℃ 50-60 zu trocknen;
5. addieren Sie 1 ml N-Hexan, dann addieren Sie die Probe 1ml, die Lösung, Erschütterung für 30s wieder auflöst;
6. entfernen Zentrifuge bei 4000 r/min bei Zimmertemperatur für Minute 10, die organische Phase der Obenschicht.
7. nehmen Sie 20 µL Untenschicht für Analyse.
Falte der Verdünnung der Probe: 5
(Weil es Beispielstörung gibt, recommend2PPB als Probe ABGESCHNITTENER Wert. )

5,2 Gewebe
homogene Probe des Gewebes 1.Take 2.0±0.05g in ein Rohr der Zentrifuge 50ml;
2.Add 8 ml-Probe, die Lösung, Erschütterung mit Oszillator für Minute 2 extrahiert;
3.Centrifuge bei 4000 r/min bei Zimmertemperatur für Minute 10;
4.Take 2 ml schwimmend, Schlag, zum mit Stickstoff oder Luft an 50-60℃ zu trocknen;
5.Add 1 ml N-Hexan, dann addieren die Probe 1ml, die Lösung, Erschütterung für 30s wieder auflöst;
6.Centrifuge bei 4000 r/min bei Zimmertemperatur für Minute 10, entfernen die organische Phase der Obenschicht.
µL 7.Take 20 Untenschicht für Analyse.
Falte der Verdünnung der Probe: 2
(Weil es Beispielstörung gibt, recommend1PPB als Probe ABGESCHNITTENER Wert. )

 

6. ELISA-Verfahren

6.1Instructions
1. holen Sie alle Reagenzien und mikro--gut Streifen zur Raumtemperatur (℃ 20-25) vor Gebrauch.
2. Rückkehr alle Reagenzien zu ℃ 2-8 sofort nach Gebrauch.
3. Die Reproduzierbarkeit der ELISA-Analyse hängt in hohem Grade von der Übereinstimmung der Plattenreinigung ab. Die korrekte Operation der Plattenreinigung ist die springenden Punkte in den Verfahren von ELISA.
4. Für die Ausbrütung bei den konstanten Temperaturen, müssen alle Proben und Reagenzien Belichtung vermeiden, und jedes microplate sollte durch die Abdeckungsmembran versiegelt werden.

Verfahren 6.2Operation
1. holen Sie Testausrüstung zur Raumtemperatur (℃ 20-25) für 30 Minute mindestens, Anmerkung, die jedes flüssige Reagens gerüttelt werden muss, um gleichmäßig vor Gebrauch zu mischen.
2. Lösungsvorbereitung: Verdünnen Sie den 20× starken waschenden Puffer 40ml mit entionisiertem Wasser am 1:19 (1-teiliger 20× starker Reinigungspuffer + 19 Teile entionisierte Wasser), oder bereiten Sie sich als benötigte Quantität vor.
3. setzen Sie die erforderlichen mikro--gut Streifen in Plattenrahmen. Versiegelte das unbenutzte microplate wieder, gespeichert bei ℃ 2-8, nicht eingefroren.
4. Nummerierung: Zahl die Mikrobrunnen entsprechend Proben und Standardlösung; jede Probe und Standardlösung sollten in doppelter Ausführung durchgeführt werden; notieren Sie ihre Positionen.
5. fügen Sie µL 50 der Probe oder die Standardlösung in unterschiedliche doppelte Brunnen hinzu; fügen Sie µL 50 des Enzymparonyms hinzu, dann fügen Sie 50 µL der Antikörperarbeitslösung in jeden Brunnen, Dichtung das microplate mit der Abdeckungsmembran, andincubate bei ℃ 25 für 30 Min. hinzu.
6. gießen Sie flüssig aus microwell, Klappe heraus, um auf saugfähigem Papier zu trocknen; fügen Sie 250 µL/well des entionisierten Wassers hinzu, waschen Sie sich für 15-30 Sekunden, nehmen Sie dann heraus und flattern Sie, um mit saugfähigem Papier zu trocknen, wiederholen Sie 4-5mal.
7. Färbung: fügen Sie 50 µL der Lösung des Substrates A, µL 50 der b-Lösung in jeden Brunnen hinzu. Mischen Sie leicht, indem Sie manuell die Platte rütteln, und brüten Sie bei 25 ℃ for15 Minute an der Dunkelheit für Färbung aus.
8. Bestimmung: addieren Sie 50, die µL von Lösung in jeden Brunnen stoppen. Mischen Sie leicht, indem Sie manuell die Platte rütteln. Stellen Sie die Wellenlänge des microplate Lesers bei 450 Nanometer ein, um den Od-Wert jedes Brunnens zu bestimmen. (Empfehlen Sie sich, den Od-Wert an der Doppel-wellenlänge zu lesen 450/630 Nanometer innerhalb Minute 5).

 

7. Ergebnisurteil

Es gibt zwei Methoden, zum der Ergebnisse zu beurteilen; das erste man ist das raue Urteil, während das zweite die quantitative Bestimmung ist. Anmerkung, dass der Od-Wert der Probe eine negative Wechselbeziehung mit dem Phenylethanolamine A in der Probe hat.

7,1 qualitative Bestimmung
Der Konzentrationsbereich (ng/mL) kann die erhaltene Form sein, die den durchschnittlichen Od-Wert der Probe mit der der Standardlösung vergleicht. , dass der Od-Wert der Probe 0,3Ⅰ, ist und das des Beispiel-Ⅱ ist- 1,0, den Od-Wert von Standardlösungen anzunehmen ist: 2,243 für 0ppb, 1,866 für 0.1ppb, 1,415 für 0.3ppb, 0,864 für 0.9ppb, 0,413 für 2.7ppb, 0,155 für 8.1ppb, dementsprechend der Konzentrationsbereich des Beispiel- Ⅰ ist- 0,3 zu 0.9ppb, und das des Beispiel-Ⅱ ist- 2.7ppb zu 8.1ppb.

7,2 quantitative Bestimmung
Die Mittelwert der Absorptionswerte, die für den durchschnittlichen Od-Wert (b) der Probe und der Standardlösung geteilt werden durch den Od-Wert (B0) erhalten werden der ersten Standardlösung (0 Standard) und, die nachher bis zum 100% multipliziert sind, das ist

 

Prozentsatz des Absorptionswertes =	B	×100%
	B0

 

B-thedurchschnitt Od-Wert der Probe oder der Standardlösung
B0-the Durchschnitt Od-Wert der 0 ng-/mLstandardlösung
Zeichnen Sie die Standardkurve mit den Absorptionsprozentsätzen der Standardlösungen und den semilogarithm Werten der Standardlösungen Phenylethanolamine A (ng/mL) als y und X-Achse, beziehungsweise. Lesen Sie die entsprechende Konzentration der Probe von der Standardkurve, indem Sie seinen Absorptionsprozentsatz in die Standardkurve enthalten. Der resultierende Wert wird nachher mit der entsprechenden Verdünnungsfalte multipliziert und schließlich erreicht die tatsächliche Konzentration von Phenylethanolamine A in der Probe.
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8. Vorkehrungen

1. Die Raumtemperatur unterhalb ℃ 25 oder die Temperatur der Reagenzien und der Proben, die nicht zur Raumtemperatur (℃ 20-25) zurückgegangen werden führen zu einen niedrigeren Standard-Od-Wert.
2. wird Trockenheit des microplate im Waschvorgang von den Situationen einschließlich die nichtlinearen Standardkurven und die unerwünschte Reproduzierbarkeit begleitet; Fahren Sie so zum nächsten Schritt sofort nach Reinigung fort.
3. hängt Mischung gleichmäßig, Wäscheplatte vollständig, die Reproduzierbarkeit der ELISA-Analyse in hohem Grade von der Übereinstimmung der Plattenreinigung ab.
4. Stoppen Sie Lösung ist die Schwefelsäure vonlösung 2 M, vermeiden, mit Haut in Verbindung zu treten.
5. Benutzen Sie nicht die Ausrüstung, die sein Verfallsdatum übersteigt. Der Gebrauch der verdünnten oder verfälschten Reagenzien von den Ausrüstungen führt zu die Änderungen in der Empfindlichkeit und in den Entdeckungsod-Werten. Tauschen Sie nicht die Reagenzien von den Ausrüstungen von verschiedenen Partienummern aus, um zu verwenden.
6. setzen Sie das unbenutzte microplate in eine Selbst-dichtungstasche, um sie wieder zu versiegeln. Die Standardsubstanz und die farblose Farbe, die ehemalig ist, ist lichtempfindlich, und folglich können sie nicht dem Licht direkt ausgesetzt werden.
7. werfen Sie die Färbungslösung mit jeder möglicher Farbe weg, die die Degeneration dieser Lösung anzeigt. Der Entdeckungswert des 0 Standard solutin von weniger als 0,5 (A450 Nanometer< 0=""> 8. Die optimale Reaktionstemperatur ist ℃ 25, und zu hohe oder niedrige Temperaturen ergeben die Änderungen in der Entdeckungsempfindlichkeit und IN Od-Werten.

9. Lagerung und Verfallsdatum

Lagerung: Speicher bei dem ℃ 2-8, nicht eingefroren.
Verfallsdatum: 12 Monate; Herstellungsdatum ist auf Kasten.
Anmerkung: Wenn die Vakuumverpackung von microplate Durchsickern hat, ist sie noch gültig zu verwenden, beeinflußt nicht das Testergebnis, ist sich zu entspannen, um zu verwenden.

 

 

 

 

 

Q1: Wann wird es versendet?
A1: Wir versenden die Waren für Sie so bald wie möglich innerhalb 7 Werktage, nachdem wir die Zahlung empfangen haben. (Im Falle der externen Faktoren wie der Epidemie, die Lieferung möglicherweise wird verzögert)

 

Q2: Stützt es OEM/ODM?
A2: Es kann gestützt werden, aber die spezifische Quantität muss mehr als 100.000 Stücke sein, die für kundengebundene Produkte bequem ist.

 

Q3: Wie tut Ihre Fabrik im Hinblick auf Qualitätskontrolle?
A3: Wir haben national ISO9001 und ISO13485 bestätigt. Unser Produktionsverfahren passt sich an Standardabläufe an, um optimale Produktqualität sicherzustellen.

 

Q4: Wie man Kundendienst erbringt?
A4: Wir erbringen Berufstechnischen on-line-Kundendienst. Wir können Sie mit Einzel- Anleitung über Video, Telefon, etc. versehen.

 

Q5: Was ist die Zahlungsmethode?
A5: Wir empfangen Zahlung durch T/T.

 

Q6: Wie man versendet?
A6: Wählen Sie den besten Versandart für Sie, indem Sie Zitate von unseren vielen kooperativen Fördermaschinen und vom auch Schiff entsprechend Ihren Anforderungen erhalten.