Serum-Test-Hühnerschweinefleisch Beta Agonists ELISA Kit For Milk Egg Urine 96 Wells/Ausrüstung

Serum-Hühnerschweinefleisch Beta Agonists ELISA Kit For Milk Egg Urine 96 Wells/Ausrüstung

 

1. Prinzip

Die Βagonisten prüfen Ausrüstung basiert auf dem wettbewerbsfähigen Enzym Immunoassay für die Entdeckung von Βagonisten in der Probe. Das Kopplungsantigen wird auf den mikro--gut Streifen vorgalvanisiert. Die Βagonisten in der Probe und in den Kopplungsantigenen, die auf den mikro--gut Streifen vorgalvanisiert werden, konkurrieren für die Anti-βagonistantikörper. Nachdem der Zusatz des Enzymparonyms, das TMB-Substrat für Färbung hinzugefügt ist. Der Wert der optischen Dichte (Od) der Probe hat eine negative Wechselbeziehung mit den Βagonisten in der Probe. Dieser Wert wird mit der Standardkurve verglichen und die Βagonistrückstände wird nachher erreicht.

 

2. Technische Spezifikationen

Empfindlichkeit: 0,1 ppb
Inkubationstemperatur: 25℃
Inkubationszeit: 30min~15min

Nachweisgrenze:
Schweineurin 0.3ppb
Schweinefleisch 0.6ppb

Kreuzreaktionsrate: Clenbuterol 100%, Cimaterol <4>

Wiederfindungsrate:
Schweineurin, Schweinefleisch 90%±30%

 

3. Komponenten

 

1	Mikro--gut Streifen	12 Streifen mit 8 entfernbar je Brunnen
2	Standardlösung 6× (1 ml jedes)	0ppb	0.1ppb
		0.3ppb	0.9ppb
		2.7ppb	8.1ppb
3	Enzymparonym	7ml	rote Kappe
4	Antikörperfunktionslösung	10ml	blaue Kappe
5	Substrat A	7ml	weiße Kappe
6	SubstrateB	7ml	schwarze Kappe
7	Stoppen Sie Lösung	7ml	gelbe Kappe
8	20× konzentrierte waschenden Puffer	40ml	weiße Kappe
9	Probe 5×, die Lösung extrahiert	50ml	transparente Kappe

 

4. Materialien erfordert aber nicht bereitgestellt

1) Ausrüstungen: microplate Leser, Drucker, Homogenisierer, Turbulenz, Oszillator, Zentrifuge, der Brutkasten, messend pipettiert, Balance (eine Empfindlichkeit gegenseitig von 0,01 g)
2) Micropipettors: Einkanal- 20-200µL, 100-1000µL und Mehrkanal-30-300µL;
3) Reagenzien: NaOH, HCI.

 

5. Beispielvorbehandlung

Anweisungen (mit die folgenden Punkte müssen vor der Vorbehandlung beschäftigt werden)
1) nur die Wegwerfspitzen können für die Experimente verwendet werden und die Spitzen müssen geändert werden, wenn sie für das Absorbieren von verschiedenen Reagenzien verwendet werden;
2) vor dem Experiment, muss jedes experimentelle Gerät sauber sein und sollte gegebenenfalls wieder-gesäubert werden, um die Verschmutzung zu vermeiden, die die Versuchsergebnisse behindert.

Lösungsvorbereitung vor Beispielvorbehandlung:
1) 0.2M HCI: lösen Sie 17.2mL HCI in entionisiertem Wasser zu 1L auf.
2) 1M NaOH: lösen Sie NaOH 4g in entionisiertem Wasser zu 100 ml auf.
3) Probe, die Lösung extrahiert: Die 1-teilige Probe 5X, die Lösung + 4 Teile extrahiert, entionisierte Wasser, Mischung gleichmäßig.

5,1 Schweineurin
Nehmen Sie 20 µL klarer Urin, ermitteln Sie es direkt (wenn Urin schlammig sind, oder Zentrifuge bei 4000 r/min für Minute 10 filtern müssen, dann klaren Urin nehmen). Speicher an gefrorener Umwelt, wenn nicht verwenden Sie.
Falte der Verdünnung der Probe: 1

5,2 Schweinefleisch
1. wiegen Sie 2±0.05g homogenisierte Gewebeprobe in ein Rohr der Zentrifuge 50ml, addieren 3ml 0.2M HCl, Erschütterung für 3 Min.
2. Addieren Sie dann 600ul 1M NaOH-Lösung und Probe 2.4ml, die bei Zimmertemperatur Lösung, Erschütterung für 3min, Zentrifuge bei 4000 r/min (℃ 20-25) extrahieren für 10 Min.
3. nehmen Sie Flüssigkeit der Obenschicht 20µL für Analyse. (Anmerkung: wenn es fette Schicht nach Zentrifuge gibt, entfernen Sie fette Schicht, oder unterschiedliche fette Schicht, nehmen klare Flüssigkeit für Analyse)
Falte der Verdünnung der Probe: 4

 

6. ELISA-Verfahren

6.1Instructions
1. holen Sie alle Reagenzien und mikro--gut Streifen zur Raumtemperatur (℃ 20-25) vor Gebrauch;
2. Rückkehr alle Reagenzien zu ℃ 2-8 sofort nach Gebrauch;
3. Die Reproduzierbarkeit der ELISA-Analyse hängt in hohem Grade von der Übereinstimmung der Plattenreinigung ab. Die korrekte Operation des Plattenwaschens ist der springende Punkt in ELISA die Verfahren;
4. Für die Ausbrütung bei den konstanten Temperaturen, müssen alle Proben und Reagenzien Belichtung vermeiden, und jedes microplate sollte durch die Abdeckungsmembran versiegelt werden.

Verfahren 6.2Operation
1. holen Sie Testausrüstung zur Raumtemperatur (℃ 20-25) für mindestens Minute 30, merken, dass jedes Reagens gleichmäßig vor Gebrauch gerüttelt werden muss;
2. setzen Sie die erforderlichen mikro--gut Streifen in Plattenrahmen. Versiegelte das unbenutzte microplate wieder, gespeichert bei ℃ 2-8, nicht eingefroren.
3. verdünnen Sie den 20X starken Puffer der Reinigung 40ml am 1:19 mit entionisiertem Wasser (1-teiliges 20X konzentrierte waschenden Puffer + 19-teiliges entionisiertes Wasser). Oder bereiten Sie sich als benötigte Quantität vor.
4. Nummerierung: Zahl die Mikrobrunnen entsprechend Proben und Standardlösung; jede Probe und Standardlösung sollten in doppelter Ausführung durchgeführt werden; notieren Sie ihre Positionen.
5. fügen Sie 20µL der Probe oder der Standardlösung in unterschiedliche doppelte Brunnen hinzu, dann addieren Sie Enzymparonym, 50ul/well; addieren Sie dann Antikörperfunktionslösung, 80µL/well. Mischen Sie leicht, indem Sie manuell die Platte, Dichtung das microplate mit der Abdeckungsmembran rütteln, brüten Sie bei ℃ 25 für 30 Min. aus.
6. gießen Sie flüssiges aus microwell heraus, fügen Sie 250µL/well des waschenden Puffers, Wäsche für 4-5mal, 15-30s jedes Mal hinzu, dann nehmen Sie heraus und flattern Sie, um mit saugfähigem Papier zu trocknen (wenn es die Blasen nach Flattern gibt, schneiden sie mit den sauberen Spitzen).
7. Färbung: fügen Sie 50µL von Substrat A hinzu, dann fügen Sie 50µL Substrat B in jeden Brunnen hinzu. Mischen Sie leicht, indem Sie manuell die Platte rütteln, und brüten Sie bei ℃ 25 für minin 15 das Dunkle für Färbung aus.
8. Bestimmung: fügen Sie 50µL von stoppen Lösung in jeden Brunnen hinzu. Mischen Sie leicht, indem Sie manuell die Platte rütteln. Stellen Sie die Wellenlänge des microplate Lesers an 450nm ein, um den Od-Wert jedes Brunnens zu bestimmen. (Empfehlen Sie sich, den Od-Wert an der Doppel-wellenlänge 450/630nm innerhalb Minute 5 zu lesen).

 

7. Ergebnisurteil

Es gibt zwei Methoden, zum der Ergebnisse zu beurteilen; das erste man ist das raue Urteil, während das zweite die quantitative Bestimmung ist. Anmerkung, dass der Od-Wert der Probe eine negative Wechselbeziehung mit Βagonistkonzentration in der Probe hat.

7,1 qualitative Bestimmung
Der Konzentrationsbereich (ng/mL) erreichte vom Vergleichen des durchschnittlichen Od-Wertes der Probe mit dem der Standardlösung. , dass der Od-Wert der Probe 0,3Ⅰ, ist und das des Beispiel-Ⅱ ist- 1,0, den Od-Wert von Standardlösungen anzunehmen ist: 2,243 für 0ppb, 1,816 für 0.1ppb, 1,415 für 0.3ppb, 0,74 für 0.9ppb, 0,313 für 2.7ppb, 0,155 für 8.1ppb, dementsprechend der Konzentrationsbereich des Beispiel- Ⅰ ist- 2,7 zu 8.1ppb, und das des Beispiel-Ⅱ ist- 0,3 zu 0.9ppb.

7,2 quantitative Bestimmung
Die Mittelwert der Absorptionswerte, die für den durchschnittlichen Od-Wert (b) der Probe und der Standardlösung geteilt werden durch den Od-Wert (B0) erhalten werden der ersten Standardlösung (0 Standard) und, die nachher bis zum 100% multipliziert sind, das ist

 

Prozentsatz des Absorptionswertes =	B	×100%
	B0

 

B-thedurchschnitt (doppelte Brunnen) Od-Wert der Probe oder der Standardlösung
B0-the Durchschnitt Od-Wert der 0 ng-/mLstandardlösung
Zeichnen Sie die Standardkurve mit den Absorptionsprozentsätzen von Standardlösungen und den semilogarithm Werten von Βagoniststandardlösungen (ng/mL) als y und X-Achse, beziehungsweise. Lesen Sie die entsprechende Konzentration der Probe von der Standardkurve, indem Sie seinen Absorptionsprozentsatz in die Standardkurve enthalten. Der resultierende Wert wird nachher mit der Verdünnungsfalte multipliziert und schließlich erreicht Βagonistkonzentration in der Probe.

 

8. Vorkehrungen

Raumtemperatur 1.The unterhalb ℃ 25 oder die Temperatur der Reagenzien und der Proben, die nicht zur Raumtemperatur (℃ 20-25) zurückgegangen werden führen zu einen niedrigeren Standard-Od-Wert.
2.Dryness des microplate im Waschvorgang wird von den Situationen einschließlich die nichtlinearen Standardkurven und die unerwünschte Reproduzierbarkeit begleitet; Fahren Sie so zum nächsten Schritt sofort nach Reinigung fort.
3.Mix gleichmäßig, andernfalls dort ist die unerwünschte Reproduzierbarkeit.
Lösung des End 4.The ist- die Schwefelsäure vonlösung 2 M, vermeiden, mit der Haut in Verbindung zu treten.
5. Benutzen Sie nicht die Ausrüstung, die sein Verfallsdatum übersteigt. Der Gebrauch der verdünnten oder verfälschten Reagenzien von den Ausrüstungen führt zu die Änderungen in der Empfindlichkeit und in den Entdeckungsod-Werten. Tauschen Sie nicht die Reagenzien von den Ausrüstungen von verschiedenen Partienummern aus, um zu verwenden.
6. setzen Sie das unbenutzte microplate in eine Selbst-dichtungstasche, um sie wieder zu versiegeln. Die Standardsubstanz und die farblose Farbe, die ehemalig ist, ist lichtempfindlich, und folglich können sie nicht dem Licht direkt ausgesetzt werden.
7. werfen Sie die Färbungslösung mit jeder möglicher Farbe weg, die die Degeneration dieser Lösung anzeigt. Der Entdeckungswert der 0 Standardlösung (0 ppb) von weniger als 0,5 zeigt seine Degeneration an.
8. Die optimale Reaktionstemperatur ist ℃ 25, und zu hohe oder zu niedrige Temperaturen ergeben die Änderungen in der Entdeckungsempfindlichkeit und IN Od-Werten.

 

9. Lagerung und Verfallsdatum

Lagerung: Speicher bei dem ℃ 2-8, nicht eingefroren.
Verfallsdatum: 12 Monate; Herstellungsdatum ist auf Kasten.
Anmerkungen: Wenn die Vakuumverpackung von Mikrotiterplatten Durchsickern hat, ist die Mikrotiterplatte normal und effektiv, beeinflussen Sie nicht das Versuchsergebnis. Glauben Sie bitte frei, um zu verwenden.

 

 

 

 

 

Q1: Wann wird es versendet?
A1: Wir versenden die Waren für Sie so bald wie möglich innerhalb 7 Werktage, nachdem wir die Zahlung empfangen haben. (Im Falle der externen Faktoren wie der Epidemie, die Lieferung möglicherweise wird verzögert)

 

Q2: Stützt es OEM/ODM?
A2: Es kann gestützt werden, aber die spezifische Quantität muss mehr als 100.000 Stücke sein, die für kundengebundene Produkte bequem ist.

 

Q3: Wie tut Ihre Fabrik im Hinblick auf Qualitätskontrolle?
A3: Wir haben national ISO9001 und ISO13485 bestätigt. Unser Produktionsverfahren passt sich an Standardabläufe an, um optimale Produktqualität sicherzustellen.

 

Q4: Wie man Kundendienst erbringt?
A4: Wir erbringen Berufstechnischen on-line-Kundendienst. Wir können Sie mit Einzel- Anleitung über Video, Telefon, etc. versehen.

 

Q5: Was ist die Zahlungsmethode?
A5: Wir empfangen Zahlung durch T/T.

 

Q6: Wie man versendet?
A6: Wählen Sie den besten Versandart für Sie, indem Sie Zitate von unseren vielen kooperativen Fördermaschinen und vom auch Schiff entsprechend Ihren Anforderungen erhalten.