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Spezifikation: | 96 Wells/Ausrüstung | Empfindlichkeit: | 0,05 ppb |
---|---|---|---|
Kreuzreaktionsrate: | Trichothecenes (T2) 100% | Brutkastenzeit: | 30 - Minute 15 |
Beispielleistung: | Zufuhr, Erdnuss, Reis | Haltbarkeitsdauer: | 12 Monate |
Schlüsselwörter: | Testausrüstung Trichothecenes (T2) ELISA | Art: | Mykotoxin-Prüfungsausrüstungen |
Hervorheben: | Testgerät Trichothecenes-Aflatoxins,T-2aflatoxin Testgerät,Erdnusstestausrüstung 3ppb |
Testausrüstung Trichothecenes (T2) ELISA für Zufuhr-Erdnuss-Reis 96 Wells/Ausrüstung
1. Prinzip
Diese Testausrüstung basiert auf dem wettbewerbsfähigen Enzym Immunoassay für die Entdeckung von Trichothecenes (T2). Das Kopplungsantigen wird auf den mikro--gut Streifen vorgalvanisiert. Das Trichothecenes (T2) in der Probe und die Kopplungsantigene, die auf den mikro--gut Streifen vorgalvanisiert werden, konkurrieren für die anti- Antikörper Trichothecenes (T2). Nachdem der Zusatz des Enzymparonyms, das TMB-Substrat für Färbung hinzugefügt ist. Der Wert der optischen Dichte (Od) der Probe hat eine negative Wechselbeziehung mit dem Trichothecenes (T2) in der Probe. Dieser Wert wird mit der Standardkurve verglichen und die Rückstände Trichothecenes (T2) wird nachher erreicht.
2. Technische Spezifikationen
Empfindlichkeit: 0,05 ppb
Brutkastentemperatur: 25℃
Brutkastenzeit: 30min~15min
Nachweisgrenze:
Zufuhr, Erdnuss, Reis 3ppb
Kreuzreaktionsrate:
Trichothecenes (T2) 100%
Wiederfindungsrate:
Zufuhr, Reis 90±25%
Erdnuss 85±25%
3. Komponenten
1 | Mikro--gut Streifen | 12 Streifen mit je 8 entfernbaren Brunnen | |
2 | Standardlösung 6× (1 ml jedes) | 0ppb | 0.05ppb |
0.15ppb | 0.45ppb | ||
1.35ppb | 4.05ppb | ||
3 | Enzymparonym | 7ml | rote Kappe |
4 | Antikörperfunktionslösung | 7ml | blaue Kappe |
5 | Substrat A | 7ml | weiße Kappe |
6 | SubstrateB | 7ml | schwarze Kappe |
7 | Stoppen Sie Lösung | 7ml | gelbe Kappe |
8 | 20× konzentrierte waschenden Puffer | 15ml | weiße Kappe |
9 | 5× konzentrierte das Wieder auflösen der Lösung | 50ml*2 | transparente Kappe |
4. Materialien erfordert aber nicht bereitgestellt
1) Ausrüstung: ELISA Reader (450 nm/630nm), Homogenisierer, Schüttel-Apparat, Zentrifuge, Balance: 0.01g Quantität empfindlich, Stickstofftrocknergerät, Brutkasten, abgestufte Pipetten, Drucker
2) Mikropipetten: Einkanal- 20ml | 200ml, 100ml | 1000ml, Mehrkanal-μl 30~300
3) Reagenzien: Methanol.
5. Beispielvorbehandlung
Anweisungen (mit die folgenden Punkte müssen vor der Vorbehandlung beschäftigt werden)
1) nur die Wegwerfspitzen können für die Experimente verwendet werden und die Spitzen müssen geändert werden, wenn sie für das Absorbieren von verschiedenen Reagenzien verwendet werden;
2) vor dem Experiment, muss jedes experimentelle Gerät sauber sein und sollte gegebenenfalls wieder-gesäubert werden, um die Verschmutzung zu vermeiden, die die Versuchsergebnisse behindert.
Lösungsvorbereitung vor Beispielvorbehandlung:
1) Sampleredissolving-Lösung
Verwenden Sie 1-teiliges von (5X) konzentriert, Lösung wieder auflösend und mit 4-teiligem des entionisierten Wassers sich aufzulösen, um die gebrauchsfertige Probe zu erhalten, die Lösung wieder auflöst.
2) Probeauszuglösung
Verwenden Sie 1-teiliges des Methanols und lösen Sie sich mit 1 Teilen der Probe Lösung wieder auflösend, um die gebrauchsfertige Probeauszuglösung zu erreichen auf.
Vorbereitung der Zufuhr, Erdnuss, Reisprobe
1) Nehmen 1.0±0.05g grinded Probe in Rohr der Zentrifuge 50ml, addiert 5ml Probeauszuglösung, Erschütterung für 3min, Zentrifuge an über 4000r/min an 20℃ für Minute 10;
2) nehmen schwimmendes 100ul (Obenschicht), addieren die Probe 400ul, die Lösung wieder auflöst, rütteln zu gleichmäßig;
3) nehmen 50μl, um zu prüfen
Verdünnungsfaktor: 25
6. ELISA-Verfahren
6,1 Anweisungen
1) holen ELISA-Reagenzien zur Raumtemperatur (20 - °C) 25 vor Gebrauch.
2) setzte ELISA-Reagenzien zurück zu ℃ 2-8 sofort nach Gebrauch
3) ist die ELISA-Reproduzierbarkeit im Analyseprozeß abhängt in großem Maße von der Übereinstimmung der waschenden Platte, die korrekte waschende Plattenoperation ist der Punkt des Programms der Bestimmung ELISA
4) in allem Prozess der Ausbrütung der konstanten Temperatur, vermeiden Sie Belichtung, Dichtung das microplate mit der Abdeckungsmembran.
6. 2 Operationsverfahren
1) holen Testausrüstung zur Raumtemperatur (℃ 20-25) für mindestens Minute 30, merken, dass jedes Reagens gleichmäßig vor Gebrauch gerüttelt werden muss;
2) setzte die erforderlichen mikro--gut Streifen in Plattenrahmen. Versiegelte das unbenutzte microplate wieder, gespeichert bei ℃ 2-8, nicht eingefroren.
3) Lösungsvorbereitung: nehmen Sie den 20× starken Puffer der Reinigung 15ml, lösen Sie sich mit entionisiertem Wasser am 1:19 (1-teiliger 20× starker Reinigungspuffer + 19 Teile entionisierte Wasser) auf, oder bereiten Sie sich als benötigte Quantität vor.
4) Nummerierung: Zahl die Mikrobrunnen entsprechend Proben und Standardlösung; jede Probe und Standardlösung sollten in doppelter Ausführung durchgeführt werden; notieren Sie ihre Positionen.
5) addieren Standard/Probe: Fügen Sie µL 50 der Probe oder die Standardlösung in unterschiedliche doppelte Brunnen hinzu, dann addieren Sie Enzymparonym, 50 µL/well; dann Antikörperfunktionslösung, 50 µL/well. Mischen Sie leicht, indem Sie manuell die Platte, Dichtung das microplate mit der Abdeckungsmembran rütteln, brüten Sie °C at25 für Minute 30 in der Dunkelheit aus.
6) Wäsche microplate: Öffnen Sie sorgfältig das Abdeckung membrance, gießen Flüssigkeit aus microwell heraus; fügen Sie 250 µL/well des Reinigungspuffers hinzu, waschen Sie sich völlig für 4-5mal, 15-30 s jedes Mal, dann nehmen Sie heraus und flattern Sie, um mit saugfähigem Papier zu trocknen. (Benutzen Sie unbenutzte Stange, um Blase nach trockenem zu durchbohren)
7) Färbung: fügen Sie µL 50 der Lösung des Substrates A dann 50 µL B Lösung in jeden Brunnen hinzu. Mischen Sie leicht, indem Sie manuell die Platte, andincubate at25 °C für 15minin die Dunkelheit für Färbung rütteln.
8) Bestimmung: addieren Sie 50, die µL von Lösung in jeden Brunnen stoppen. Mischen Sie leicht, indem Sie manuell die Platte rütteln. Stellen Sie die Wellenlänge des microplate Lesers bei 450 Nanometer ein, um den Od-Wert jedes Brunnens zu bestimmen. (Empfehlen Sie sich, den Od-Wert an der Doppel-wellenlänge zu lesen 450/630 Nanometer innerhalb Minute 5).
7. Ergebnisurteil
Es gibt zwei Methoden, zum der Ergebnisse zu beurteilen; das erste man ist das raue Urteil, während das zweite die quantitative Bestimmung ist. Anmerkung, dass der Od-Wert der Probe eine negative Wechselbeziehung mit dem Trichothecenes (T2) in der Probe hat
7,1 qualitative Bestimmung
Der Konzentrationsbereich (ppb) kann erhalten werden, durch verglichen worden der durchschnittliche Absorptionswert mit Standards. Nehmen Sie an, dass Absorptionswert von Probe man 0,3 ist, ist Probe zwei 1,0, und die Standards sind: 0ppb von 2,243; 0.05ppb von 1,816; 0.15ppb von 1,415; 0.45ppb von 0,74; 1.35ppb von 0,313; 4.05ppb von 0,155. Dann ist die Konzentration der Probe man im Bereich von 1.35ppb | 4.05ppb; Probe zwei ist 0.15ppb | 0.45ppb. Der Konzentrationsbereich von Trichothecenes (T2) in den Proben kann erhalten werden, durch multipliziert worden mit der entsprechenden Verdünnung der Probe.
7. quantitative Analyse 2
Um die Konzentration von Proben zu berechnen, sollte eine Standardkurve gemacht werden. Bevor Standardkurve gemacht wird, sollte das Konzept von % Absorption zu wissen sein.
Berechnung von % Absorption:
Prozentsatz des Absorptionswertes = | B | ×100% |
B0 |
B-thedurchschnitt Od-Wert der Probe oder der Standardlösung
B0-the Durchschnitt Od-Wert der 0 ng-/mLstandardlösung
Der nullstandard wird folglich gleich bis 100% gemacht und die Absorptionswerte werden in den Prozentsätzen zitiert. Die Werte berechneten für die Standards werden eingeführt in einem System von Koordinaten auf semilogarithmic Zeichenpapier mit Maßeinteilung gegen die Konzentration Trichothecenes (T2) [ng/mL]. Die Konzentration Trichothecenes (T2) in ng/mL entsprechend der Absorption jeder Probe kann von der Eichkurve gelesen werden.
Eine spezielle Software für Ergebnisanalyse von ELISA erleichtert die doppelten oder mehrfachen Bestimmungen. Wenn Sie brauchen, nennen Sie bitte, um zu verlangen.
8. Vorkehrungen
1) führen die Raumtemperatur unterhalb ℃ 25 oder die Temperatur der Reagenzien und der Proben, die nicht zur Raumtemperatur (℃ 20-25) zurückgegangen werden zu einen niedrigeren Standard-Od-Wert.
2) wird Trockenheit des microplate im Waschvorgang von den Situationen einschließlich die nichtlinearen Standardkurven und die unerwünschte Reproduzierbarkeit begleitet; Fahren Sie so zum nächsten Schritt sofort nach Reinigung fort.
3) Mischung gleichmäßig, bevor alle mögliche Reagenzien addiert werden.
4) ist- die Endlösung die Schwefelsäure vonlösung 2 M, vermeiden, mit der Haut in Verbindung zu treten.
5) benutzen nicht die Ausrüstung, die sein Verfallsdatum übersteigt. Der Gebrauch der verdünnten oder verfälschten Reagenzien von den Ausrüstungen führt zu die Änderungen in der Empfindlichkeit und in den Entdeckungsod-Werten. Tauschen Sie nicht die Reagenzien von den Ausrüstungen von verschiedenen Partienummern aus, um zu verwenden.
6) Lagerung: Speicher bei dem ℃ 2-8, nicht eingefroren. Setzen Sie das unbenutzte microplate in eine Selbst-dichtungstasche, um sie wieder zu versiegeln. Die Standardsubstanz und die farblose Farbe, die ehemalig ist, ist lichtempfindlich, und folglich können sie nicht dem Licht direkt ausgesetzt werden.
7) werfen die Färbungslösung mit jeder möglicher Farbe weg, die die Degeneration dieser Lösung anzeigt. Der Entdeckungswert (450/630nm) der 0 Standardlösung (0 ppb) von weniger als 0,5 ((A450nm<0>
8) die optimale Reaktionstemperatur ist 25℃, und zu hohe oder zu niedrige Temperaturen ergeben die Änderungen in der Entdeckungsempfindlichkeit und IN Od-Werten.
9. Lagerung und Verfallsdatum
Lagerung: Speicher bei dem ℃ 2-8, nicht eingefroren.
Verfallsdatum: 12 Monate; Herstellungsdatum ist auf Kasten.
Anmerkung: Wenn die Vakuumverpackung von microplate Durchsickern hat, ist sie noch gültig zu verwenden, beeinflußt nicht das Testergebnis, ist sich zu entspannen, um zu verwenden.
Q1: Wie lang nimmt es, damit Sie versenden?
A1: Normalerweise Schiffe innerhalb 7 Werktage.
Q2: Stützen Sie OEM/ODM?
A2: kann gestützt werden. Wir können entsprechend Ihrem spezifischen Bedarf und spezifischen Quantitäten besonders anfertigen.
Q3: Wie tut Ihre Fabrik im Hinblick auf Qualitätskontrolle?
A3: Wir haben Bescheinigung ISO9001 und ISO13485 Bescheinigung, bis jetzt das ganzes Produktionsverfahren, haben wir Standardregeln, willigen wir mit dem relevanten Verhalten und den Gesetzen der Regierung ein.
Q4: Wird Kundendienst garantiert?
A4: Wir erbringen Berufstechnischen on-line-Kundendienst. Wenn das Produkt während des Experimentes ausfällt, können wir zur Verfügung stellen
eins-zu-eins Anleitung durch Telefon, Video und andere Formen.
Q5: Was ist Ihre Mindestbestellmenge?
A5: 1Kit.
Q6: Was ist der Versandart?
A6: Es kann durch Eil (FEDEX, UPS, DHL, EMS, etc.) oder auf dem Luftweg und Boden versendet werden. Bestätigen Sie bitte mit uns, bevor Sie einen Auftrag vergeben.