Mykotoxin-Prüfungsausrüstungen 0.1ppb Zearalenone für Zufuhr-Mais 96 Wells/Ausrüstung

Zearalenone ELISA Test Kit für Zufuhr-Mais 96 Wells/Kit Sensitivity 0,1 ppb

 

1. Prinzip

Diese Testausrüstung basiert auf dem wettbewerbsfähigen Enzym Immunoassay für die Entdeckung von Zearalenone. Das Kopplungsantigen wird auf den mikro--gut Streifen vorgalvanisiert. Das Zearalenone in der Probe und die Kopplungsantigene, die auf den mikro--gut Streifen vorgalvanisiert werden, konkurrieren für die anti- Zearalenone-Antikörper. Nachdem der Zusatz des Enzymparonyms, das TMB-Substrat für Färbung hinzugefügt ist. Der Wert der optischen Dichte (Od) der Probe hat eine negative Wechselbeziehung mit dem Zearalenone in der Probe. Dieser Wert wird mit der Standardkurve verglichen und die Zearalenone-Rückstände wird nachher erreicht.

2. Technische Spezifikationen

Empfindlichkeit: 0,1 ppb
Brutkastentemperatur: 25℃
Brutkastenzeit: 30min~15min

Nachweisgrenze:
Zufuhr 10ppb
Reis, Mais, Erdnuss 5ppb

Kreuzreaktionsrate:
Zearalenone 100%

Wiederfindungsrate:
Zufuhr, Reis, Erdnuss, Mais 100±30%

3. Komponenten

 

 

1	Mikro--gut Streifen	12 Streifen mit je 8 entfernbaren Brunnen
2	Standardlösung 6× (1 ml jedes)	0 ppb	0,1 ppb
		0,3 ppb	0,9 ppb
		ppb 2,7	ppb 8,1
3	Enzymparonym	7 ml	rote Kappe
4	Antikörperfunktionslösung	7 ml	blaue Kappe
5	Substrat A	7 ml	weiße Kappe
6	SubstrateB	7 ml	schwarze Kappe
7	Stoppen Sie Lösung	7 ml	gelbe Kappe
8	20X konzentrierte waschenden Puffer	40 ml	weiße Kappe
9	2X konzentrierte das Wieder auflösen der Lösung	50 ml	transparente Kappe

 

4. Materialien erfordert aber nicht bereitgestellt

1) Ausrüstung: ELISA Reader (450 nm/630nm), Homogenisierer, Schüttel-Apparat, Zentrifuge, Balance: 0.01g Quantität empfindlich, Stickstofftrocknergerät, Brutkasten, abgestufte Pipetten, Drucker
2) Mikropipetten: Einkanal- 20l | 200l, 100l | 1000l, Mehrkanal-μl 30~300
3) Reagenzien: Methanol, N-Hexan.

5. Beispielvorbehandlung

Anweisungen (mit die folgenden Punkte müssen vor der Vorbehandlung beschäftigt werden)
1) nur die Wegwerfspitzen können für die Experimente verwendet werden und die Spitzen müssen geändert werden, wenn sie für das Absorbieren von verschiedenen Reagenzien verwendet werden;
2) vor dem Experiment, muss jedes experimentelle Gerät sauber sein und sollte gegebenenfalls wieder-gesäubert werden, um die Verschmutzung zu vermeiden, die die Versuchsergebnisse behindert.

Lösungsvorbereitung vor Beispielvorbehandlung:
Lösungsnr. 1: Probieren Sie das wieder auflösen
Das 2×concentrated, das Lösung wieder auflöst, wird mit entionisiertem Wasser am 1:1 (1-teilige starke wieder auflösende Lösung + 1-teiliges entionisiertes Wasser) verdünnt, verwendet für Beispieldas wieder auflösen.
Lösungsnr. 2: Probeauszuglösung
7 Teile Methanol + 3 Teile entionisiertes Wasser, zum der gebrauchsfertigen Probeauszuglösung zu erreichen.

Beispielvorbereitung
5,1 Vorbereitung der Zufuhrprobe
1) nehmen 1.0±0.05g grinded Zufuhrprobe in Rohr der Zentrifuge 50ml, addieren 5ml Probeauszuglösung;
2) Erschütterung vollständig für 3min (oder für über 5min eigenhändig rütteln), Zentrifuge an über 4000r/min an 20℃ für Minute 10;
3) nehmen schwimmendes 50ul (Obenschicht), addieren die wieder auflösende Probe 950ul, rütteln zu gleichmäßig;
4) nehmen 50μl, um zu prüfen
Verdünnungsfaktor: 100
Anmerkung: wenn die Drogenrückstandkonzentration in der Probe aus Kurvenstrecke heraus ist, kann die Probe für Test weiter verdünnt werden (zum Beispiel: nehmen Sie schwimmendes 50ul (Obenschicht) in ein neues Zentrifugenrohr, addieren Sie 1450ul entionisierte Wasser, der Verdünnungsfaktor ist 150).

5.2Preparation von Mais, Reisprobe
1) nehmen 1.0±0.05g grinded Probe in Rohr der Zentrifuge 50ml; addieren Sie 5ml Probeauszuglösung;
2) Erschütterung vollständig für 3min (oder für über 5min eigenhändig rütteln), Zentrifuge an über 4000r/min an 20℃ für Minute 10;
3) nehmen schwimmendes 100ul (Obenschicht), addieren die wieder auflösende Probe 900ul, rütteln zu gleichmäßig;
4) nehmen 50μl, um zu prüfen
Verdünnungsfaktor: 50
Anmerkung: Wenn die Drogenrückstandkonzentration der Probe aus Kurvenstrecke heraus ist, kann die Probe für Test weiter verdünnt werden (zum Beispiel: nehmen Sie schwimmendes 50ul (Obenschicht) in ein neues Zentrifugenrohr, addieren Sie 950 entionisiertes Wasser, der Verdünnungsfaktor ist 100).

5.3Preparation der Erdnussprobe
1) nehmen 1.0±0.05g grinded Erdnussprobe in Rohr der Zentrifuge 50ml; addieren Sie 5ml Probeauszuglösung, dann addieren Sie N-Hexan 4ml;
2) Erschütterung vollständig für 3min (oder für über 5min eigenhändig rütteln), Zentrifuge an über 4000r/min an 20℃ für Minute 10;
3) nehmen klare Flüssigkeit der Ausschussobenschicht, Flüssigkeit der Mittlerschicht 100ul, addieren die wieder auflösende Probe 900ul, rütteln zu gleichmäßig;
4) nehmen 50μl, um zu prüfen
Verdünnungsfaktor: 50
Anmerkung: Wenn die Drogenrückstandkonzentration der Probe aus Kurvenstrecke heraus ist, kann die Probe für Test weiter verdünnt werden (zum Beispiel: nehmen Sie Flüssigkeit der Mittlerschicht 50ul in ein neues Zentrifugenrohr, addieren Sie 950 entionisiertes Wasser, der Verdünnungsfaktor ist 100).

 

6. ELISA-Verfahren

6,1 Anweisungen
1. holen Sie ELISA-Reagenzien zur Raumtemperatur (20 - °C) 25 vor Gebrauch.
2. setzen Sie ELISA-Reagenzien zurück zu ℃ 2-8 sofort nach Gebrauch
3. Die ELISA-Reproduzierbarkeit im Analyseprozeß ist abhängt in großem Maße von der Übereinstimmung der waschenden Platte, die korrekte waschende Plattenoperation ist der Punkt des Programms der Bestimmung ELISA
4. In allem Prozess der Ausbrütung der konstanten Temperatur, vermeiden Sie Belichtung, Dichtung das microplate mit der Abdeckungsmembran.

6,2 Operationsverfahren

1. Setzen Sie die Ausrüstung bei Zimmertemperatur (20-25°C) für mindestens 30 Minuten, merken Sie, dass jedes Reagens lange vor Gebrauch gerüttelt werden muss;
2. Platz die gewünschten microwell Streifen im Plattenrahmen. Unbenutzte microplates sollten an 2-8°C wieder versiegelt werden und gespeichert werden, nicht eingefroren worden.
3. Lösungsvorbereitung: Nehmen Sie 40ml von 20× konzentrierte waschenden Puffer und ihn in entionisiertem Wasser an einem Verhältnis des 1:19 aufzulösen (1-teilig von 20× starkem Reinigungspuffer + 19 Teile entionisiertes Wasser), oder sich vorbereitet, wie erforderlich.
4. Nummerierung: Nummerieren Sie die microwells entsprechend den Proben und den Standardlösungen; jede Probe und Standardlösung sollten in doppelter Ausführung erfolgt sein; notieren Sie ihre Positionen.
5. addieren Sie Standard/Probe: Fügen Sie µL 50 der Probe hinzu, oder die Standardlösung, zum von doppelten Brunnen zu trennen, addieren dann Enzymparonym, 50 µL/well; dann Antikörperfunktionslösung, 50 µL/well. Mischen Sie leicht, indem Sie eigenhändig die Platte, Dichtung das microplate mit einem Abdeckungsfilm rütteln, und brüten Sie bei °C 25 für Minute 30 in der Dunkelheit aus.
6. Wäsche das microplate: Öffnen Sie sorgfältig den Abdeckungsfilm und gießen Sie heraus die Flüssigkeit im microwell; fügen Sie 250 µL/well des Reinigungspuffers hinzu, waschen Sie gänzlich 4-5mal für 15-30 s jedes Mal, entfernen Sie es dann mit saugfähigem Papier trockenes Pat. (Stechen Sie die Luftblasen mit einer unbenutzten Stange, nachdem Sie getrocknet haben)
7. Farbentwicklung: Fügen Sie das µL 50 der Lösung des Substrates A jedem Brunnen hinzu, leicht gefolgt von µL 50 der Lösung B. Mix, von die Platte eigenhändig rütteln und brüten Sie für Minute 15 bei °C 25 in der Dunkelheit für das Beflecken aus.
8. Probe: Fügen Sie µL 50 der Endlösung jedem Brunnen hinzu. Mischen Sie leicht, indem Sie eigenhändig die Platte rütteln. Stellen Sie die Wellenlänge des microplate Lesers bis 450 Nanometer ein, um den Od-Wert jedes Brunnens zu bestimmen. (Es wird empfohlen, um Od-Werte an den Doppelwellenlängen zu lesen 450/630 Nanometer innerhalb 5 Minuten).

 

7. Ergebnisurteil

Es gibt zwei Methoden, zum der Ergebnisse zu beurteilen; das erste man ist das raue Urteil, während das zweite die quantitative Bestimmung ist. Anmerkung, dass der Od-Wert der Probe eine negative Wechselbeziehung mit dem Zearalenone in der Probe hat
7,1 qualitative Bestimmung
Der Konzentrationsbereich (ppb) kann erhalten werden, durch verglichen worden der durchschnittliche Absorptionswert mit Standards. Nehmen Sie an, dass Absorptionswert von Probe man 0,3 ist, ist Probe zwei 1,0, und die Standards sind: 0ppb von 2,243; 0.1ppb von 1,816; 0.3ppb von 1,415; 0.9ppb von 0,74; 2.7ppb von 0,313; 8.1ppb von 0,155. Dann ist die Konzentration der Probe man im Bereich von 2.7ppb | 8.1ppb; Probe zwei ist 0.3ppb | 0.9ppb. Der Konzentrationsbereich von Zearalenone in den Proben kann erhalten werden, durch multipliziert worden mit der entsprechenden Verdünnung der Probe.
7. quantitative Analyse 2
Um die Konzentration von Proben zu berechnen, sollte eine Standardkurve gemacht werden. Bevor Standardkurve gemacht wird, sollte das Konzept von % Absorption zu wissen sein.
Berechnung von % Absorption:

 

Prozentsatz des Absorptionswertes =	B	×100%
	B0

B-thedurchschnitt Od-Wert der Probe oder der Standardlösung
B0-the Durchschnitt Od-Wert der 0 ng-/mLstandardlösung
Der nullstandard wird folglich gleich bis 100% gemacht und die Absorptionswerte werden in den Prozentsätzen zitiert. Die Werte berechneten für die Standards werden eingeführt in einem System von Koordinaten auf semilogarithmic Zeichenpapier mit Maßeinteilung gegen die Zearalenone-Konzentration [ng/mL]. Die Zearalenone-Konzentration in ng/ml entsprechend der Absorption jeder Probe kann von der Eichkurve gelesen werden.
Eine spezielle Software für Ergebnisanalyse von ELISA erleichtert die doppelten oder mehrfachen Bestimmungen. Wenn Sie brauchen, nennen Sie bitte, um zu verlangen.

8. Vorkehrungen

1. Die Raumtemperatur unterhalb ℃ 25 oder die Temperatur der Reagenzien und der Proben, die nicht zur Raumtemperatur (℃ 20-25) zurückgegangen werden führen zu einen niedrigeren Standard-Od-Wert.
2. wird Trockenheit des microplate im Waschvorgang von den Situationen einschließlich die nichtlinearen Standardkurven und die unerwünschte Reproduzierbarkeit begleitet; Fahren Sie so zum nächsten Schritt sofort nach Reinigung fort.
3. Mischung gleichmäßig, bevor alle mögliche Reagenzien addiert werden.
4. Die Endlösung ist- die Schwefelsäure vonlösung 2 M, vermeiden, mit der Haut in Verbindung zu treten.
5. Benutzen Sie nicht die Ausrüstung, die sein Verfallsdatum übersteigt. Der Gebrauch der verdünnten oder verfälschten Reagenzien von den Ausrüstungen führt zu die Änderungen in der Empfindlichkeit und in den Entdeckungsod-Werten. Tauschen Sie nicht die Reagenzien von den Ausrüstungen von verschiedenen Partienummern aus, um zu verwenden.
6. Lagerung: Speicher bei dem ℃ 2-8, nicht eingefroren. Setzen Sie das unbenutzte microplate in eine Selbst-dichtungstasche, um sie wieder zu versiegeln. Die Standardsubstanz und die farblose Farbe, die ehemalig ist, ist lichtempfindlich, und folglich können sie nicht dem Licht direkt ausgesetzt werden.
7. werfen Sie die Färbungslösung mit jeder möglicher Farbe weg, die die Degeneration dieser Lösung anzeigt. Der Entdeckungswert (450/630nm) der 0 Standardlösung (0 ppb) von weniger als 0,5 ((A450nm<0> 8. Die optimale Reaktionstemperatur ist ℃ 25, und zu hohe oder zu niedrige Temperaturen ergeben die Änderungen in der Entdeckungsempfindlichkeit und IN Od-Werten.

9. Lagerung und Verfallsdatum

Lagerung: Speicher bei dem ℃ 2-8, nicht eingefroren.
Verfallsdatum: 12 Monate; Herstellungsdatum ist auf Kasten.
Anmerkung: Wenn die Vakuumverpackung von microplate Durchsickern hat, ist sie noch gültig zu verwenden, beeinflußt nicht das Testergebnis, ist sich zu entspannen, um zu verwenden.

 

 

 

 

 

 

 

Q1: Wann wird es versendet?
A1: Wir versenden die Waren für Sie so bald wie möglich innerhalb 7 Werktage, nachdem wir die Zahlung empfangen haben. (Im Falle der externen Faktoren wie der Epidemie, die Lieferung möglicherweise wird verzögert)

 

Q2: Stützt es OEM/ODM?
A2: Es kann gestützt werden, aber die spezifische Quantität muss mehr als 100.000 Stücke sein, die für kundengebundene Produkte bequem ist.

 

Q3: Wie tut Ihre Fabrik im Hinblick auf Qualitätskontrolle?
A3: Wir haben national ISO9001 und ISO13485 bestätigt. Unser Produktionsverfahren passt sich an Standardabläufe an, um optimale Produktqualität sicherzustellen.

 

Q4: Wie man Kundendienst erbringt?
A4: Wir erbringen Berufstechnischen on-line-Kundendienst. Wir können Sie mit Einzel- Anleitung über Video, Telefon, etc. versehen.

 

Q5: Was ist die Zahlungsmethode?
A5: Wir empfangen Zahlung durch T/T.

 

Q6: Wie man versendet?
A6: Wählen Sie den besten Versandart für Sie, indem Sie Zitate von unseren vielen kooperativen Fördermaschinen und vom auch Schiff entsprechend Ihren Anforderungen erhalten.