Nitrofuran SEM ELISA Food Safety Test Kit für Milch-Empfindlichkeit 0.02ppb 96Wells/Kit

Nitrofuran SEM ELISA Food Safety Test Kit für Milch-Empfindlichkeit 0.02ppb 96Wells/Kit

 

1. Nitrofuran-SEM ELISA Food Safety Test Kit-Prinzip

 

Diese Testausrüstung basiert auf dem wettbewerbsfähigen Enzym Immunoassay für die Entdeckung des Nitrofurans (SEM) in der Probe. Die Kopplungsantigene werden auf den mikro--gut Streifen vorgalvanisiert. Das Nitrofuran (SEM) in der Probe und die Kopplungsantigene, die auf den mikro--gut Streifen vorgalvanisiert werden, konkurrieren für die AntiSEM-Antikörper. Nachdem der Zusatz des Enzymparonyms, das TMB-Substrat für Färbung hinzugefügt ist. Der Wert der optischen Dichte (Od) der Probe hat eine negative Wechselbeziehung mit SEM in ihm. Dieser Wert wird mit der Standardkurve verglichen und die SEM-Konzentration wird nachher erreicht.

 

2. Technische Spezifikationen

 

Empfindlichkeit: 0.02ppb

Inkubationstemperatur: 25℃

Inkubationszeit: 30min~15min

Nachweisgrenze Gewebe, Ei, Honig: 0.1ppb

Kreuzreaktionsrate

SEM 100%

AMOZ < 0="">

AOZ < 0="">

AHD < 0="">

Wiederfindungsrate

Gewebe 75±25%

Honig 70±20%

Ei 95±25%

 

3. Nitrofuran-SEM ELISA Food Safety Test Kit-Komponenten

 

1	Mikro--gut Streifen	12 Streifen mit 8 entfernbar je Brunnen
2	Standardlösung 6× (1 ml jedes)	0ppb	0.02ppb
		0.06ppb	0.18ppb
		0.54ppb	1.62ppb
3	Enzymparonym	7ml	rote Kappe
4	Antikörperfunktionslösung	7ml	blaue Kappe
5	Substrat A	7ml	weiße Kappe
6	SubstrateB	7ml	schwarze Kappe
7	Stoppen Sie Lösung	7ml	gelbe Kappe
8	20× konzentrierte waschenden Puffer	40ml	weiße Kappe
9	2× konzentrierte das Wieder auflösen der Lösung	50ml	transparente Kappe
10	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)	10ml	schwarze Kappe

 

4. Materialien erfordert aber nicht bereitgestellt

 

1) Ausrüstungen: microplate Leser, Drucker, Homogenisierer, Stickstofftrocknergerät, Turbulenz, die Zentrifuge, messend pipettiert, Balance (eine gegenseitige Empfindlichkeit von 0,01 g), Brutkasten, Wasserbad;

2) Micropipettors: Einkanal- 20-200µL, 100-1000µL und Mehrkanal-30~300µl;

3) Reagenzien: NaOH, Ethylacetat, N-Hexan, HCI (ungefähre 36,5%), K2HPO4·3H2O.

 

5. Beispielvorbehandlung

 

Anweisungen

Mit die folgenden Punkte müssen vor der Vorbehandlung der Art der Probe irgendwie beschäftigt werden:

1) Nur die Wegwerfspitzen können für die Experimente verwendet werden und die Spitzen müssen geändert werden, wenn sie für das Absorbieren von verschiedenen Reagenzien verwendet werden;

2) Vor dem Experiment muss jede experimentelle Ausrüstung sauber sein und sollte gegebenenfalls wieder-gesäubert werden, um die Verschmutzung zu vermeiden, die die Versuchsergebnisse behindert.

Lösungsvorbereitung vor Beispielvorbehandlung:

1) 0,1 M K2HPO4: lösen Sie g 11,4 K2HPO4 auf·3H2O in entionisiertem Wasser zu 500mL.

2) 1 M HCl: lösen Sie 8.6mL HCI (ungefähre 36,5%) in entionisiertem Wasser zu 100mL auf.

3) 1 m-NaOH: lösen Sie NaOH 4g in entionisiertem Wasser zu 100mL auf.

4) das 2×concentrated, das Lösung wieder auflöst, wird mit entionisiertem Wasser am 1:1 (1mL konzentrierte das Wieder auflösen der Lösung + des 1mL entionisierten Wassers), verdünnt, verwendet für Beispieldas wieder auflösen.

 

5,1 Beispielvorbereitung

a) Gewebe, Ei

1) Wiegen Sie 1± 0.05g der homogenisierten Probe, fügen Sie 4mL des destillierten Wassers, 0.5mL 1 M HCI hinzu und 100µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) zu jedem Rohr, rütteln richtig für 2min;.

2) Brüten Sie ℃ at37 in Nacht (Stunden approx16) aus oder brüten Sie at56℃ durch Wasserbad aus (2 Stunden).

3) Fügen Sie 5mL 0.1M K2HPO4, 0.4mL 1M NaOH und 6mL Ethylacetat jedem Rohr, Erschütterung für 30s hinzu.

4) Zentrifuge an oben genanntem 4000r/min bei Zimmertemperatur (℃ 20-25) für 10min (wenn es Emulgierung gibt, oder Ethylacetatschicht nicht genug für 3ml ist, Probe am Wasserbad 80℃ für 10min und Zentrifuge wiederholt ausbrütet; oder erhöhen Sie Geschwindigkeit und verlängern Sie Zeit der Zentrifuge).

5) Übertragung 3mL der Ethylacetatschicht in ein neues zentrifugales Rohr und auf Stickstoff oder dem Luftweg an 50℃ trocken verdunsten.

6) Lösen Sie die trockenen Rückstände im N-Hexan 2mL auf, fügen Sie 1mL der verdünnten wieder auflösenden Lösung, Mischung richtig für 30 Sekunden, Zentrifuge an über 4000 r/min bei Zimmertemperatur (℃ 20-25) für Minute 10 hinzu; Entfernen Sie Obenschicht N-Hexan Phase (wenn es Emulgierung, nachdem man Obenschicht N-Hexan Phase gibt entfernt hat, Probe am Wasserbad 70℃ für 10-20min ausbrütet, wiederholt zentrifugiert).

7) Nehmen Sie 50 µL vom niedrigeren für Analyse.

Falte der Verdünnung der Probe: 2

b) Honig

1) Wiegen Sie 2± 0.05g der homogenisierten Probe (Honig), fügen Sie 4mL des destillierten Wassers, 0.5mL 1 M HCI hinzu und 100 µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) zu jedem Rohr, rütteln richtig für 2min;.

2) Brüten Sie ℃ at37 in Nacht (Stunden approx16) aus oder brüten Sie at56℃ durch Wasserbad aus (2 Stunden).

3) Fügen Sie 5mL 0.1M K2HPO4, 0.4mL 1M NaOH und 6mL Ethylacetat jedem Rohr, Erschütterung für 30s hinzu.

4) Zentrifuge an oben genanntem 4000r/min bei Zimmertemperatur (20-25℃) für 10min (wenn es Emulgierung gibt, oder Ethylacetatschicht nicht genug für 3ml ist, Probe am Wasserbad 80℃ für 10min und Zentrifuge wiederholt ausbrütet; oder erhöhen Sie Geschwindigkeit und verlängern Sie Zeit der Zentrifuge).

5) Übertragung 3mL der Ethylacetatschicht in ein neues zentrifugales Rohr und auf Stickstoff oder dem Luftweg bei ℃ 50 trocken verdunsten.

6) Lösen Sie die trockenen Rückstände im N-Hexan 2mL auf, fügen Sie 1mL der verdünnten wieder auflösenden Lösung, Mischung richtig für 30 Sekunden, Zentrifuge an über 4000r/min bei Zimmertemperatur (℃ 20-25) für Minute 10 hinzu; Entfernen Sie Obenschicht N-Hexan Phase (wenn es Emulgierung, nachdem man Obenschicht N-Hexan Phase gibt entfernt hat, Probe am Wasserbad 70℃ für 10-20min ausbrütet, wiederholt zentrifugiert).

7) Nehmen Sie 50 µL vom niedrigeren für Analyse.

Falte der Verdünnung der Probe: 1

 

6. ELISA-Verfahren

 

6,1 Anweisungen

1) Holen Sie alle Reagenzien und mikro--gut Streifen zur Raumtemperatur (℃ 20-25) vor Gebrauch;

2) Bringen Sie alle Reagenzien zu ℃ 2-8 sofort nach Gebrauch zurück;

3) Die Reproduzierbarkeit der ELISA-Analyse hängt in hohem Grade von der Übereinstimmung der Plattenreinigung ab. Die korrekte Operation des Plattenwaschens ist der springende Punkt in ELISA die Verfahren;

4) Für die Ausbrütung bei den konstanten Temperaturen, müssen alle Proben und Reagenzien Belichtung vermeiden, und jedes microplate sollte durch die Abdeckungsmembran versiegelt werden.

 

6,2 Operationsverfahren

1) Setzen Sie die Ausrüstung bei Zimmertemperatur (20-25°C) für mindestens 30 Minuten, merken Sie, dass jedes Reagens lange vor Gebrauch gerüttelt werden und gemischt werden muss, und setzen Sie die erforderlichen microwell Streifen in den Plattenrahmen. Unbenutzte microplates sollten an 2-8°C wieder versiegelt werden und gespeichert werden, nicht eingefroren worden.

2) Lösungsvorbereitung: Nehmen 40 ml 20× konzentrierte waschenden Puffer und verdünnt ihn mit entionisiertem Wasser am 1:19 (1-teilig von 20× starkem Reinigungspuffer + 19 Teile entionisiertes Wasser). Oder bereiten Sie vor sich, wie gebraucht.

3) Nummerierung: Nummerieren Sie die microwells entsprechend den Proben und den Standardlösungen; jede Probe und Standardlösung sollten in doppelter Ausführung gemacht werden, und ihre Positionen sollten notiert werden.

4) Fügen Sie 50µL der Probe oder der Standardlösung hinzu, um Brunnen zu kopieren; fügen Sie 50ul des Enzymparonyms jedem Brunnen hinzu, fügen Sie dann 50µL der Antikörperarbeitslösung, hinzu und rütteln Sie die Platte, um leicht zu mischen. Versiegeln Sie das microplate mit einem Abdeckungsfilm und brüten Sie an 25°C für 30min aus.

5) Gießen Sie heraus die Flüssigkeit in den microwells, den Klaps, der auf saugfähigem Papier trocken ist, fügen Sie 250 μL/well des waschenden Puffers, um die Mikrotiterplatte für 15-30s zu waschen hinzu, nehmen Sie dann heraus und tappen Sie trockenes mit saugfähigem Papier, wiederholen Sie 4-5mal. (Wenn schnitt es Luftblasen gibt, nachdem man geklopft hat, sie mit einer sauberen Spitze ab).

6) Farbentwicklung: Fügen Sie µL 50 µL von Substrat A und 50 von Substrat B jedem Brunnen hinzu. Rütteln Sie die Platte eigenhändig, um leicht zu mischen und an 25°C für Minute 15 in der Dunkelheit für Farbentwicklung auszubrüten.

7) Probe: Fügen Sie μL 50 der Endlösung jedem Brunnen hinzu. Mischen Sie leicht, indem Sie eigenhändig die Platte rütteln. Stellen Sie die Wellenlänge des microplate Lesers bis 450 Nanometer ein, um den Od-Wert jedes Brunnens zu bestimmen. (Es wird empfohlen, um den Od-Wert an der Doppelwellenlänge 450/630nm innerhalb 5 Minuten zu lesen).

 

7. Ergebnisurteil

 

Es gibt zwei Methoden, zum der Ergebnisse zu beurteilen: das erste man ist das raue Urteil, während das zweite die quantitative Bestimmung ist. Anmerkung, dass der Od-Wert der Probe eine negative Wechselbeziehung mit dem Inhalt von SEM hat.

7,1 qualitative Bestimmung

Der Konzentrationsbereich (ng/mL) kann vom Vergleichen des durchschnittlichen Od-Wertes der Probe mit dem der Standardlösung erhalten werden. , dass der Od-Wert der Probe 0,3Ⅰ, ist und das des Beispiel-Ⅱ ist- 1.0ppb, den Od-Wert von Standardlösungen anzunehmen ist: 2,243 für 0ppb, 1,816 für 0.02ppb, 1,415 für 0.06ppb, 0,74 für 0.18ppb, 0,313 für 0.54ppb, 0,155 für 1.62ppb, dementsprechend der Konzentrationsbereich des Beispiel- Ⅰ ist- 0,54 zu 1.62ppb, und das des Beispiel-Ⅱ ist- 0,06 zu 0.18ppb.

7,2 quantitative Bestimmung

Die Mittelwert der Absorptionswerte wird für den durchschnittlichen Od-Wert (b) der Probe und der Standardlösung erhalten, die durch den Od-Wert (B0) geteilt werden der ersten Standardlösung (0 Standard) und nachher bis zum 100% d.h., die multipliziert sind

Prozentsatz des Absorptionswertes =	B	×100%
	B0

B-thedurchschnitt (doppelte Brunnen) Od-Wert der Probe oder der Standardlösung

B0-the Durchschnitt Od-Wert der Standardlösung 0ng/mL

Zeichnen Sie die Standardkurve mit den Absorptionsprozentsätzen der Standardlösung und den semilogarithm Werten der SEM-Standardlösung (ng/mL) als y und X-Achse, beziehungsweise. Lesen Sie die entsprechende Konzentration der Probe von der Standardkurve, indem Sie seinen Absorptionsprozentsatz in die Standardkurve enthalten. Der resultierende Wert wird nachher mit der entsprechenden Verdünnungsfalte multipliziert und schließlich erreicht die SEM-Konzentration in der Probe.

 

8. Vorkehrungen

 

1) Wenn die Raumtemperatur niedriger ist, als 25℃ oder die Reagenstemperatur und die Probe nicht zur Raumtemperatur (20-25℃) zurückgehen, fällt der Standard-Od-Wert.

2) Während des Waschvorgangs wird der Trockner des microplate von der Nichtlinearität der Standardkurve begleitet, und die Reproduzierbarkeit ist nicht ideal; deshalb gehen Sie zum nächsten Schritt sofort nach Reinigung über.

3) Mischen Sie gut, andernfalls ist die Reproduzierbarkeit arm.

4) Die Endlösung ist- Schwefelsäure vonlösung 2 M, vermeiden Hautkontakt.

5) Benutzen Sie nicht die Ausrüstung über der Haltbarkeitsdauer hinaus. Der Gebrauch der verdünnten oder verfälschten Reagenzien von der Ausrüstung kann Änderungen in Empfindlichkeit und Entdeckung ergeben Od-Werten. Ersetzen Sie nicht Reagenzien in den verschiedenen Reihen von Ausrüstungen.

6) Versiegeln Sie unbenutzte microplates Taschen in den mit Reißverschluss wieder. Standardlösungen und farblose Koppler sind lichtempfindlich und können nicht direkt herausgestellt werden, um zu beleuchten.

7) Werfen Sie jede mögliche Färbungslösung weg, deren Farbe anzeigt, dass die Lösung vermindert hat. Ein Entdeckungswert von weniger als 0,5 für Standardlösung 1 (0 ppb) zeigt Verminderung an.

8) Die optimale Reaktionstemperatur ist 25℃, und die Entdeckungsempfindlichkeit und Od-Wert ändern, wenn die Temperatur zu hoch oder zu niedrig ist.

 

9. Lagerung und Verfallsdatum

 

Lagerung: Speicher an 2-8°C, frieren kein.
Verfallsdatum: 12 Monate; Produktionsdatum ist auf dem Kasten.
Anmerkung: Wenn die microplate vakuumverpackenden Lecks, es ohne die Testergebnisse zu beeinflussen, also, Sie noch benutzt werden können kann sie im Vertrauen verwenden.

 

Q1: Wann wird es versendet?
A1: Wir versenden die Waren für Sie so bald wie möglich innerhalb 7 Werktage, nachdem wir die Zahlung empfangen haben. (Im Falle der externen Faktoren wie der Epidemie, die Lieferung möglicherweise wird verzögert)

 

Q2: Stützt es OEM/ODM?
A2: Es kann gestützt werden, aber die spezifische Quantität muss mehr als 100.000 Stücke sein, die für kundengebundene Produkte bequem ist.

 

Q3: Wie tut Ihre Fabrik im Hinblick auf Qualitätskontrolle?
A3: Wir haben national ISO9001 und ISO13485 bestätigt. Unser Produktionsverfahren passt sich an Standardabläufe an, um optimale Produktqualität sicherzustellen.

 

Q4: Wie man Kundendienst erbringt?
A4: Wir erbringen Berufstechnischen on-line-Kundendienst. Wir können Sie mit Einzel- Anleitung über Video, Telefon, etc. versehen.

 

Q5: Was ist die Zahlungsmethode?
A5: Wir empfangen Zahlung durch T/T.

 

Q6: Wie man versendet?
A6: Wählen Sie den besten Versandart für Sie, indem Sie Zitate von unseren vielen kooperativen Fördermaschinen und vom auch Schiff entsprechend Ihren Anforderungen erhalten.