Antikörper des Nitrofuran-AHD ELISA Food Rapid Test Kit für Milch-Empfindlichkeit 0.04ppb 96Wells/Kit

Nitrofuran AHD ELISA Food Safety Test Kit für Milch-Empfindlichkeit 0.04ppb 96Wells/Kit

 

1. Prinzip des Nitrofuran-AHD ELISA Food Safety Test Kit

 

Diese Testausrüstung basiert auf dem wettbewerbsfähigen Enzym Immunoassay für die Entdeckung von Aminohydantion (AHD) in der Probe. Die Kopplungsantigene werden auf den mikro--gut Streifen vorgalvanisiert. Das Aminohydantion (AHD) in der Probe und die Kopplungsantigene, die auf den mikro--gut Streifen vorgalvanisiert werden, konkurrieren für die anti--AHD Antikörper. Nachdem der Zusatz des Enzymparonyms, das TMB-Substrat für Färbung hinzugefügt ist. Der Wert der optischen Dichte (Od) der Probe hat eine negative Wechselbeziehung mit dem AHD in ihm. Dieser Wert wird mit der Standardkurve verglichen und die AHD-Konzentration wird nachher erreicht.

 

2. Technische Spezifikationen des Nitrofurans AHD ELISA Food Safety Test Kit

 

Empfindlichkeit: 0.04ppb

Inkubationstemperatur: 25℃

Inkubationszeit: 30min~15min

Nachweisgrenze Gewebe, Ei, Honig: 0.1ppb

Kreuzreaktionsrate

AHD 100%

AMOZ < 0="">

AOZ < 0="">

SEM < 0="">

Wiederfindungsrate

Gewebe, Ei 95±25%

Honig 75±25%

 

3. Komponenten

 

1	Mikro--gut Streifen	12 Streifen mit 8 entfernbar je Brunnen
2	Standardlösung 6× (1 ml jedes)	0ppb	0.04ppb
		0.12ppb	0.36ppb
		1.08ppb	3.24ppb
3	Enzymparonym	7ml	rote Kappe
4	Antikörperfunktionslösung	7ml	blaue Kappe
5	Substrat A	7ml	weiße Kappe
6	SubstrateB	7ml	schwarze Kappe
7	Stoppen Sie Lösung	7ml	gelbe Kappe
8	20× konzentrierte waschenden Puffer	40ml	weiße Kappe
9	2× konzentrierte das Wieder auflösen der Lösung	50ml	transparente Kappe
10	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)	10ml	schwarze Kappe

 

4. Materialien erfordert aber nicht bereitgestellt

 

1) Ausrüstungen: microplate Leser, Drucker, Homogenisierer, Stickstofftrocknergerät, Turbulenz, die Zentrifuge, messend pipettiert, Balance (eine gegenseitige Empfindlichkeit von 0,01 g), Brutkasten, Wasserbad;

2) Micropipettors: Einkanal- 20-200µL, 100-1000µL und Mehrkanal-30~300µl;

3) Reagenzien: NaOH, Ethylacetat, N-Hexan, HCI (ungefähre 36,5%), K2HPO4·3H2O

 

5. Beispielvorbehandlung

 

Anweisungen

Mit die folgenden Punkte müssen vor der Vorbehandlung der Art der Probe irgendwie beschäftigt werden:

1) Nur die Wegwerfspitzen können für die Experimente verwendet werden und die Spitzen müssen geändert werden, wenn sie für das Absorbieren von verschiedenen Reagenzien verwendet werden;

2) Vor dem Experiment muss jede experimentelle Ausrüstung sauber sein und sollte gegebenenfalls wieder-gesäubert werden, um die Verschmutzung zu vermeiden, die die Versuchsergebnisse behindert.

Lösungsvorbereitung vor Beispielvorbehandlung:

ein) 0,1 M K2HPO4: lösen Sie 11.4g K2HPO4 auf·3H2O in entionisiertem Wasser zu 500mL.

b) 1 M HCl: lösen Sie 8.6mL HCI (ungefähre 36,5%) in entionisiertem Wasser zu 100mL auf.

c) 1 m-NaOH: lösen Sie NaOH 4g in entionisiertem Wasser zu 100mL auf.

d) das 2×concentrated, das Lösung wieder auflöst, wird mit entionisiertem Wasser am 1:1 (1mL konzentrierte das Wieder auflösen der Lösung + 1 ml entionisiertes Wasser), verdünnt, verwendet für Beispieldas wieder auflösen.

 

5,1 Beispielvorbereitung

a) Gewebe, Ei

1) Wiegen Sie 1± 0.05g der homogenisierten Probe, fügen Sie 4mL des destillierten Wassers, 0.5mL 1 M HCI hinzu und 100µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) zu jedem Rohr, rütteln richtig für 2min;.

2) Brüten Sie ℃ at37 in Nacht (Stunden approx16) aus oder brüten Sie at56℃ durch Wasserbad aus (2 Stunden).

3) Fügen Sie 5mL 0.1M K2HPO4, 0.4mL 1M NaOH und 6mL Ethylacetat jedem Rohr, Erschütterung für 30s hinzu.

4) Zentrifuge an oben genanntem 4000r/min bei Zimmertemperatur (℃ 20-25) für 10min (wenn es Emulgierung gibt, oder Ethylacetatschicht nicht genug für 3ml ist, Probe am Wasserbad 80℃ für 10min und Zentrifuge wiederholt ausbrütet; oder erhöhen Sie Geschwindigkeit und verlängern Sie Zeit der Zentrifuge).

5) Übertragung 3mL der Ethylacetatschicht in ein neues zentrifugales Rohr und auf Stickstoff oder dem Luftweg an 50℃ trocken verdunsten.

6) Lösen Sie die trockenen Rückstände im N-Hexan 2mL auf, fügen Sie 1mL der verdünnten wieder auflösenden Lösung, Mischung richtig für 30 Sekunden, Zentrifuge an über 4000 r/min bei Zimmertemperatur (℃ 20-25) für Minute 10 hinzu; Entfernen Sie Obenschicht N-Hexan Phase (wenn es Emulgierung, nachdem man Obenschicht N-Hexan Phase gibt entfernt hat, Probe am Wasserbad 70℃ für 10-20min ausbrütet, wiederholt zentrifugiert).

7) Nehmen Sie 50 µL vom niedrigeren für Analyse.

Falte der Verdünnung der Probe: 2

b) Honig

1) Wiegen Sie 2± 0.05g der homogenisierten Probe (Honig), fügen Sie 4mL des destillierten Wassers, 0.5mL 1 M HCI hinzu und 100 µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) zu jedem Rohr, rütteln richtig für 2min;.

2) Brüten Sie ℃ at37 in Nacht (Stunden approx16) aus oder brüten Sie at56℃ durch Wasserbad aus (2 Stunden).

3) Fügen Sie 5mL 0.1M K2HPO4, 0.4mL 1M NaOH und 6mL Ethylacetat jedem Rohr, Erschütterung für 30s hinzu.

4) Zentrifuge an oben genanntem 4000r/min bei Zimmertemperatur (20-25℃) für 10min (wenn es Emulgierung gibt, oder Ethylacetatschicht nicht genug für 3ml ist, Probe am Wasserbad 80℃ für 10min und Zentrifuge wiederholt ausbrütet; oder erhöhen Sie Geschwindigkeit und verlängern Sie Zeit der Zentrifuge).

5) Übertragung 3mL der Ethylacetatschicht in ein neues zentrifugales Rohr und auf Stickstoff oder dem Luftweg bei ℃ 50 trocken verdunsten.

6) Lösen Sie die trockenen Rückstände im N-Hexan 2mL auf, fügen Sie 1mL der verdünnten wieder auflösenden Lösung, Mischung richtig für 30 Sekunden, Zentrifuge an über 4000r/min bei Zimmertemperatur (℃ 20-25) für Minute 10 hinzu; Entfernen Sie Obenschicht N-Hexan Phase (wenn es Emulgierung, nachdem man Obenschicht N-Hexan Phase gibt entfernt hat, Probe am Wasserbad 70℃ für 10-20min ausbrütet, wiederholt zentrifugiert).

7) Nehmen Sie 50 µL vom niedrigeren für Analyse.

Falte der Verdünnung der Probe: 1

 

6. ELISA-Verfahren

 

6,1 Anweisungen

1) Holen Sie alle Reagenzien und mikro--gut Streifen zur Raumtemperatur (℃ 20-25) vor Gebrauch;

2) Bringen Sie alle Reagenzien zu ℃ 2-8 sofort nach Gebrauch zurück;

3) Die Reproduzierbarkeit der ELISA-Analyse hängt in hohem Grade von der Übereinstimmung der Plattenreinigung ab. Die korrekte Operation des Plattenwaschens ist der springende Punkt in ELISA die Verfahren;

4) Für die Ausbrütung bei den konstanten Temperaturen, müssen alle Proben und Reagenzien Belichtung vermeiden, und jedes microplate sollte durch die Abdeckungsmembran versiegelt werden.

 

6,2 Operationsverfahren

1) Holen Sie Testausrüstung zur Raumtemperatur (℃ 20-25) für mindestens 30min, merken Sie, dass jedes Reagens gerüttelt werden muss, um gleichmäßig vor Gebrauch zu mischen, setzen Sie die erforderlichen mikro--gut Streifen in Plattenrahmen. Versiegelte das unbenutzte microplate, Speicher bei dem ℃ 2-8 wieder, nicht eingefroren.

2) Lösungsvorbereitung: verdünntes 40mL des 20 × starken waschenden Puffers mit entionisiertem Wasser am 1:19 (1-teiliger 20 × starker waschender Puffer + 19 Teile entionisierte Wasser). Oder bereiten Sie vor sich, wie gebraucht.

3) Nummerierung: Zahl die Mikrobrunnen entsprechend Proben und Standardlösung; jede Probe und Standardlösung sollten in doppelter Ausführung durchgeführt werden, notieren ihre Positionen.

4) Fügen Sie 50µL der Probe oder der Standardlösung in unterschiedliche doppelte Brunnen hinzu; fügen Sie Paronym dann 50µL der Antikörperfunktionslösung in jeden Brunnen, Mischung des Enzyms 50ul leicht hinzu, indem Sie manuell die Platte rütteln. Versiegeln Sie das microplate mit der Abdeckungsmembran, andincubate bei ℃ 25 für 30min.

5) Gießen Sie Flüssigkeit aus microwell, Klappe heraus, um auf saugfähigem Papier zu trocknen, fügen Sie 250µL/well des waschenden Puffers hinzu, um microplate für 15-30s zu waschen, nehmen Sie dann heraus und flattern Sie, um mit saugfähigem Papier zu trocknen, wiederholen Sie 4-5mal. (Wenn schnitt es die Blasen gibt, nachdem man geflattert hat, sie mit den sauberen Spitzen).

6) Färbung: fügen Sie 50µL des Substrates A und dann 50µL des Substrates B in jeden Brunnen hinzu. Mischen Sie leicht, indem Sie manuell die Platte, dann rütteln, brüten Sie bei ℃ 25 für Minute 15 an der Dunkelheit für Färbung aus.

7) Bestimmung: fügen Sie 50µL von stoppen Lösung in jeden Brunnen hinzu. Mischen Sie leicht, indem Sie manuell die Platte rütteln. Stellen Sie die Wellenlänge des microplate Lesers an 450nm ein, um den Od-Wert jedes Brunnens zu bestimmen. (Empfehlen Sie sich, den Od-Wert an der Doppel-wellenlänge 450/630nm innerhalb 5 Minuten zu lesen).

 

7. Ergebnisurteil

 

Es gibt zwei Methoden, zum der Ergebnisse zu beurteilen: das erste man ist das raue Urteil, während das zweite die quantitative Bestimmung ist. Anmerkung, dass der Od-Wert der Probe eine negative Wechselbeziehung mit dem Inhalt von AHD hat.

7,1 qualitative Bestimmung

Der Konzentrationsbereich (ng/mL) kann vom Vergleichen des durchschnittlichen Od-Wertes der Probe mit dem der Standardlösung erhalten werden. , dass der Od-Wert der Probe 0,3Ⅰ, ist und das des Beispiel-Ⅱ ist- 1.0ppb, den Od-Wert von Standardlösungen anzunehmen ist: 2,243 für 0ppb, 1,816 für 0.04ppb, 1,415 für 0.12ppb, 0,74 für 0.36ppb, 0,313 für 1.08ppb, 0,155 für 3.24ppb, dementsprechend der Konzentrationsbereich des Beispiel- Ⅰ ist- 1,08 zu 3.24ppb, und das des Beispiel-Ⅱ ist- 0,12 zu 0.36ppb.

7,2 quantitative Bestimmung

Die Mittelwert der Absorptionswerte wird für den durchschnittlichen Od-Wert (b) der Probe und der Standardlösung erhalten, die durch den Od-Wert (B0) geteilt werden der ersten Standardlösung (0 Standard) und nachher bis zum 100% d.h., die multipliziert sind

Prozentsatz des Absorptionswertes =	B	×100%
	B0

B-thedurchschnitt (doppelte Brunnen) Od-Wert der Probe oder der Standardlösung

B0-the Durchschnitt Od-Wert der Standardlösung 0ng/mL

Zeichnen Sie die Standardkurve mit den Absorptionsprozentsätzen der Standardlösung und den semilogarithm Werten der AHD-Standardlösung (ng/mL) als y und X-Achse, beziehungsweise. Lesen Sie die entsprechende Konzentration der Probe von der Standardkurve, indem Sie seinen Absorptionsprozentsatz in die Standardkurve enthalten. Der resultierende Wert wird nachher mit der entsprechenden Verdünnungsfalte multipliziert und schließlich erreicht die AHD-Konzentration in der Probe.

 

8. Vorkehrungen

 

1) Die Raumtemperatur ist niedriger, als 25℃ oder die Reagenstemperatur und -probe nicht zur Raumtemperatur (20-25℃) zurückgebracht werden, die den Standard-Od-Wert veranlaßt sich zu verringern.

2) Während des Waschvorgangs wird der Trockner des microplate von der Nichtlinearität der Standardkurve und der unbefriedigenden Reproduzierbarkeit begleitet; deshalb gehen Sie zum nächsten Schritt sofort nach Reinigung über.

3) Mischen Sie gut, andernfalls gibt es schlechte Reproduzierbarkeit.

4) Stoppen Sie Lösung ist Schwefelsäure vonlösung 2 M, vermeiden Kontakt mit Haut.

5) Benutzen Sie nicht die Ausrüstung über dem Verfallsdatum hinaus. Der Gebrauch der verdünnten oder verfälschten Reagenzien von der Ausrüstung kann Änderungen in Empfindlichkeit und Entdeckung ergeben Od-Werten. Ersetzen Sie nicht Reagenzien in den verschiedenen Reihen von Ausrüstungen.

6) Versiegeln Sie unbenutzte microplates in selbstdichtenden Taschen wieder. Standardlösungen und farblose Koppler sind lichtempfindlich und können nicht direkt herausgestellt werden, um zu beleuchten.

7) Werfen Sie jede mögliche abtönende Lösung weg, deren Farbe anzeigt, dass die Lösung vermindert hat. Ein Entdeckungswert von weniger als 0,5 für Standardlösung 1 (0 ppb) zeigt Verminderung an.

8) Die optimale Reaktionstemperatur ist 25℃, und die Entdeckungsempfindlichkeit und Od-Wert ändern, wenn die Temperatur zu hoch oder zu niedrig ist.

 

9. Lagerung und Verfallsdatum

 

Lagerung: Speicher bei dem ℃ 2 bis 8, nicht eingefroren.

Verfallsdatum: 12 Monate; Herstellungsdatum ist auf Kasten.

Anmerkung: Wenn die Vakuumverpackung von microplate Durchsickern hat, ist sie noch gültig zu verwenden, beeinflußt nicht das Testergebnis, ist sich zu entspannen, um zu verwenden.

 

 

Q1: Wann wird es versendet?
A1: Wir versenden die Waren für Sie so bald wie möglich innerhalb 7 Werktage, nachdem wir die Zahlung empfangen haben. (Im Falle der Epidemie und anderer externer Faktoren, möglicherweise es gibt Verzögerungen im Verschiffen)

 

Q2: Stützt es OEM/ODM?
A2: Es kann gestützt werden, aber die spezifische Quantität muss mehr als 100.000 Stücke sein, zum von kundengebundenen Produkten zu erleichtern.

 

Q3: Wie tut Ihre Fabrik im Hinblick auf Qualitätskontrolle?
A3: Wir lassen ISO9001 und ISO13485 durch den Zustand bestätigen. Unser Produktionsverfahren stimmt mit dem Standardverfahren überein, das garantieren kann, dass die Qualität der Produkte optimal ist.

 

Q4: Wie wird Kundendienst erbracht?
A4: Wir erbringen Berufstechnischen on-line-Kundendienst. Wir können Sie mit Einzel- Anleitung in Form von Video, Telefonanrufen, etc. versehen.

 

Q5: Was ist die Zahlungsmethode?
A5: Wir empfangen Zahlung durch T/T.

 

Q6: Wie man versendet?
A6: Indem Sie Zitate von unseren vielen kooperativen Fördermaschinen erhalten, wählen Sie die beste Weise, für Sie zu versenden, oder Sie können entsprechend Ihren Anforderungen versenden.