Nitrofuran AMOZ ELISA Food Safety Rapid Test Kit For Milk Sensitivity 0.03ppb 96Wells/Kit

Nitrofuran AMOZ ELISA Food Safety Test Kit für Milch-Empfindlichkeit 0.03ppb 96Wells/Kit

 

1. Prinzip des Nitrofuran-AMOZ ELISA Food Safety Test Kit

 

Diese Entdeckungsausrüstung basiert auf einem wettbewerbsfähigen Enzym Immunoassay für die Entdeckung von AMOZ in den Proben. Konjugierte Antigene werden auf microwell Streifen vorgalvanisiert. Das AMOZ in der Probe konkurriert mit dem konjugierten Antigen, das auf dem microwell Streifen für den anti--AMOZ Antikörper vorgalvanisiert wird. Nachdem das Enzymparonym addiert ist, wird TMB-Substrat für das Beflecken hinzugefügt. Der Wert der optischen Dichte (Od) einer Probe wird negativ mit dem AMOZ in ihm aufeinander bezogen. Dieser Wert wird mit einer Standardkurve verglichen und die AMOZ-Konzentration wird nachher erreicht.

 

2. Technische Spezifikationen

 

Empfindlichkeit: 0.03ppb

Inkubationstemperatur: 25℃

Inkubationszeit: 30min~15min

Nachweisgrenze Gewebe, Ei, Honig: 0.1ppb

Kreuzreaktionsrate

AMOZ 100%

AHD < 0="">

AOZ < 0="">

SEM < 0="">

Wiederfindungsrate

Gewebe 80 ± 25%

Honig 75 ± 25%

Ei 95 ± 25%

 

3. Komponenten des Nitrofuran-AMOZ ELISA Food Safety Test Kit

 

1	Mikro--gut Streifen	12 Streifen mit 8 entfernbar je Brunnen
2	Standardlösung 6× (1 ml jedes)	0ppb	0.03ppb
		0.09ppb	0.27ppb
		0.81ppb	2.43ppb
3	Enzymparonym	7ml	rote Kappe
4	Antikörperfunktionslösung	7ml	blaue Kappe
5	Substrat A	7ml	weiße Kappe
6	SubstrateB	7ml	schwarze Kappe
7	Stoppen Sie Lösung	7ml	gelbe Kappe
8	20× konzentrierte waschenden Puffer	40ml	weiße Kappe
9	2× konzentrierte das Wieder auflösen der Lösung	50ml	transparente Kappe
10	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)

 

4. Materialien erfordert aber nicht bereitgestellt

 

1) Ausrüstung: microplate Leser, Drucker, Homogenisierer, Stickstofftrockner, vortexer, Zentrifuge, Messrohr, Balance (gegenseitiges 0.01g), Brutkasten, Wasserbad;

2) Mikropipette: Einfachkanal 20-200µL, 100-1000µL, Mehrkanal-30-300µl;

3) Reagenzien: NaOH, Ethylacetat, N-Hexan, HCl (ungefähr 36,5%), K2HPO4 3H2O.

 

5. Beispielvorbehandlung

 

weisen Sie an

Die folgenden Punkte müssen vor irgendeiner Art Beispielvorbehandlung angesprochen werden:

1) Das Experiment kann Wegwerfspitzen nur verwenden, und die Spitzen müssen ersetzt werden, wenn man verschiedene Reagenzien ansaugt;

2) Vor dem Experiment muss die experimentelle Ausrüstung gegebenenfalls gesäubert werden und wieder-gesäubert werden, um die Verschmutzung zu vermeiden, die die Versuchsergebnisse behindert.

Lösungsvorbereitung vor Beispielvorbehandlung:

1) 0,1 M K2HPO4: Lösen Sie g 11,4 von K2HPO4 auf·3H2O in entionisiertem Wasser zu 500 ml.

2) 1 M HCl: Lösen Sie 8,6 ml HCl (ungefähr 36,5%) in entionisiertem Wasser zu 100 ml auf.

3) 1 m-NaOH: Lösen Sie 4 g von NaOH in entionisiertem Wasser zu 100 ml auf.

4) Verdünntes 2× konzentrierte das Wieder auflösen der Lösung mit entionisiertem Wasser am 1:1 (1 ml konzentriert, Lösung wieder auflösend + 1 ml entionisiertes Wasser) für Beispieldas wieder auflösen.

 

5,1 Beispielvorbereitung

ein) Gewebe, Ei

1) Wiegen Sie 1± 0.05g der homogenisierten Probe, fügen Sie 4mL des destillierten Wassers, 0.5mL 1 M HCI hinzu und 100µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) zu jedem Rohr, rütteln richtig für 2min;.

2) Brüten Sie at37℃ in Nacht (Stunden approx16) aus oder brüten Sie at56℃ durch Wasserbad aus (2 Stunden).

3) Fügen Sie 5mL 0.1M K2HPO4, 0.4mL 1M NaOH und 6mL Ethylacetat jedem Rohr, Erschütterung für 30s hinzu.

4) Zentrifuge an oben genanntem 4000r/min bei Zimmertemperatur (℃ 20-25) für 10min (wenn es Emulgierung gibt, oder Ethylacetatschicht nicht genug für 3ml ist, Probe bei 80 ℃ Wasserbad für 10min und Zentrifuge wiederholt ausbrütet; oder erhöhen Sie Geschwindigkeit und verlängern Sie Zeit der Zentrifuge).

5) Übertragung 3mL der Ethylacetatschicht in ein neues zentrifugales Rohr und auf Stickstoff oder dem Luftweg an 50℃ trocken verdunsten.

6) Lösen Sie die trockenen Rückstände im N-Hexan 2mL auf, fügen Sie 1mL der verdünnten wieder auflösenden Lösung, Mischung richtig für 30 Sekunden, Zentrifuge an über 4000 r/min bei Zimmertemperatur (℃ 20-25) für Minute 10 hinzu; Entfernen Sie Obenschicht N-Hexan Phase (wenn es Emulgierung, nachdem man Obenschicht N-Hexan Phase gibt entfernt hat, Probe bei 70 ℃ Wasserbad für 10-20min ausbrütet, wiederholt zentrifugiert).

7) Nehmen Sie 50 µL vom niedrigeren für Analyse.

Falte der Verdünnung der Probe: 2

b) Honig

1) Wiegen Sie 2± 0.05g der homogenisierten Probe (Honig), fügen Sie 4mL des destillierten Wassers, 0.5mL 1 M HCI hinzu und 100 µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) zu jedem Rohr, rütteln richtig für 2min;.

2) Brüten Sie at37℃ in Nacht (Stunden approx16) aus oder brüten Sie at56℃ durch Wasserbad aus (2 Stunden).

3) Fügen Sie 5mL 0.1M K2HPO4, 0.4mL 1M NaOH und 6mL Ethylacetat jedem Rohr, Erschütterung für 30s hinzu.

4) Zentrifuge an oben genanntem 4000r/min bei Zimmertemperatur (20-25℃) für 10min (wenn es Emulgierung gibt, oder Ethylacetatschicht nicht genug für 3ml ist, Probe bei 80 ℃ Wasserbad für 10min und Zentrifuge wiederholt ausbrütet; oder erhöhen Sie Geschwindigkeit und verlängern Sie Zeit der Zentrifuge).

5) Übertragung 3mL der Ethylacetatschicht in ein neues zentrifugales Rohr und auf Stickstoff oder dem Luftweg bei ℃ 50 trocken verdunsten.

6) Lösen Sie die trockenen Rückstände im N-Hexan 2mL auf, fügen Sie 1mL der verdünnten wieder auflösenden Lösung, Mischung richtig für 30 Sekunden, Zentrifuge an über 4000r/min bei Zimmertemperatur (℃ 20-25) für Minute 10 hinzu; Entfernen Sie Obenschicht N-Hexan Phase (wenn es Emulgierung, nachdem man Obenschicht N-Hexan Phase gibt entfernt hat, Probe bei 70 ℃ Wasserbad für 10-20min ausbrütet, wiederholt zentrifugiert).

7) Nehmen Sie 50 µL vom niedrigeren für Analyse.

Falte der Verdünnung der Probe: 1

 

6. ELISA-Verfahren

 

6,1 Anweisungen

1) Holen Sie alle Reagenzien und mikro--gut Streifen zur Raumtemperatur (℃ 20-25) vor Gebrauch;

2) Bringen Sie alle Reagenzien zu ℃ 2-8 sofort nach Gebrauch zurück;

3) Die Reproduzierbarkeit der ELISA-Analyse hängt in hohem Grade von der Übereinstimmung der Plattenreinigung ab. Die korrekte Operation des Plattenwaschens ist der springende Punkt in ELISA die Verfahren;

4) Für die Ausbrütung bei den konstanten Temperaturen, müssen alle Proben und Reagenzien Belichtung vermeiden, und jedes microplate sollte durch die Abdeckungsmembran versiegelt werden.

6,2 Operationsverfahren

1) Holen Sie Testausrüstung zur Raumtemperatur (℃ 20-25) für mindestens Minute 30, merken Sie, dass jedes Reagens gerüttelt werden muss, um gleichmäßig vor Gebrauch zu mischen, setzen Sie die erforderlichen mikro--gut Streifen in Plattenrahmen. Versiegelte das unbenutzte microplate, Speicher bei dem ℃ 2-8 wieder, nicht eingefroren.

2) Lösungsvorbereitung: verdünntes 40mL des 20 × starken waschenden Puffers mit entionisiertem Wasser am 1:19 (1-teiliger 20 × starker waschender Puffer + 19 Teile entionisierte Wasser). Oder bereiten Sie vor sich, wie gebraucht.

3) Nummerierung: Zahl die Mikrobrunnen entsprechend Proben und Standardlösung; jede Probe und Standardlösung sollten in doppelter Ausführung durchgeführt werden, notieren ihre Positionen.

4) Fügen Sie 50µL der Probe oder der Standardlösung in unterschiedliche doppelte Brunnen hinzu; fügen Sie Paronym dann 50µL der Antikörperfunktionslösung in jeden Brunnen, Mischung des Enzyms 50ul leicht hinzu, indem Sie manuell die Platte rütteln. Versiegeln Sie das microplate mit der Abdeckungsmembran, andincubate bei 25 ℃ for30min.

5) Gießen Sie Flüssigkeit aus microwell, Klappe heraus, um auf saugfähigem Papier zu trocknen, fügen Sie 250 µL/well des waschenden Puffers hinzu, um microplate für 15-30s zu waschen, nehmen Sie dann heraus und flattern Sie, um mit saugfähigem Papier zu trocknen, wiederholen Sie 4-5mal. (Wenn schnitt es die Blasen gibt, nachdem man geflattert hat, sie mit den sauberen Spitzen).

6) Färbung: fügen Sie µL 50 µL des Substrates A und dann 50 des Substrates B in jeden Brunnen hinzu. Mischen Sie leicht, indem Sie manuell die Platte, dann rütteln, brüten Sie bei ℃ 25 für Minute 15 an der Dunkelheit für Färbung aus.

7) Bestimmung: fügen Sie 50µL von stoppen Lösung in jeden Brunnen hinzu. Mischen Sie leicht, indem Sie manuell die Platte rütteln. Stellen Sie die Wellenlänge des microplate Lesers an 450nm ein, um den Od-Wert jedes Brunnens zu bestimmen. (Empfehlen Sie sich, den Od-Wert an der Doppel-wellenlänge 450/630nm innerhalb 5 Minuten zu lesen).

 

7. Ergebnisurteil

 

Es gibt zwei Methoden, zum der Ergebnisse zu beurteilen: das erste man ist das raue Urteil, während das zweite die quantitative Bestimmung ist. Anmerkung, dass der Od-Wert der Probe eine negative Wechselbeziehung mit der AMOZ-Konzentration hat.

7,1 qualitative Bestimmung

Der Konzentrationsbereich (ng/mL) von AMOZ kann vom Vergleichen des durchschnittlichen Od-Wertes der Probe mit dem der Standardlösung erhalten werden. , dass der Od-Wert der Probe 0,3Ⅰ, ist und das des Beispiel-Ⅱ ist- 1,0, den Od-Wert von Standardlösungen anzunehmen ist: 2,243 für 0ppb, 1,816 für 0.03ppb, 1,415 für 0.09ppb, 0,74 für 0.27ppb, 0,313 für 0.81ppb, 0,155 für 2.43ppb, dementsprechend der Konzentrationsbereich des Beispiel- Ⅰ ist- 0,81 zu 2.43ppb, und das des Beispiel-Ⅱ ist- 0,09 zu 0.27ppb.

7,2 quantitative Bestimmung

Die Mittelwert der Absorptionswerte wird für den durchschnittlichen Od-Wert (b) der Probe und der Standardlösung erhalten, die durch den Od-Wert (B0) geteilt werden der ersten Standardlösung (0 Standard) und nachher bis zum 100% d.h., die multipliziert sind

Prozentsatz des Absorptionswertes =	B	×100%
	B0

B-thedurchschnitt Od-Wert der Probe oder der Standardlösung

B0-the Durchschnitt Od-Wert der 0 ng-/mLstandardlösung

Zeichnen Sie die Standardkurve mit den Absorptionsprozentsätzen der Standardlösung und den semilogarithm Werten der AMOZ-Standardlösung (ng/mL) als y und X-Achse, beziehungsweise. Lesen Sie die entsprechende Konzentration der Probe von der Standardkurve, indem Sie seinen Absorptionsprozentsatz in die Standardkurve enthalten. Der resultierende Wert wird nachher mit der entsprechenden Verdünnungsfalte multipliziert und schließlich erreicht die AMOZ-Konzentration in der Probe.

 

8. Vorkehrungen

 

1) Wenn die Raumtemperatur niedriger ist, als 25℃ oder die Reagenstemperatur und die Probe nicht zur Raumtemperatur (20-25℃) zurückgehen, fällt der Standard-Od-Wert.

2) Während des Waschvorgangs wird der Trockner des microplate von der Nichtlinearität der Standardkurve begleitet, und die Reproduzierbarkeit ist nicht ideal; deshalb gehen Sie zum nächsten Schritt sofort nach Reinigung über.

3) Mischen Sie gut, andernfalls ist die Reproduzierbarkeit arm.

4) Die Endlösung ist- Schwefelsäure vonlösung 2 M, vermeiden Hautkontakt.

5) Benutzen Sie nicht die Ausrüstung über der Haltbarkeitsdauer hinaus. Der Gebrauch der verdünnten oder verfälschten Reagenzien von der Ausrüstung kann Änderungen in Empfindlichkeit und Entdeckung ergeben Od-Werten. Ersetzen Sie nicht Reagenzien in den verschiedenen Reihen von Ausrüstungen.

6) Versiegeln Sie unbenutzte microplates Taschen in den mit Reißverschluss wieder. Standardlösungen und farblose Koppler sind lichtempfindlich und können nicht direkt herausgestellt werden, um zu beleuchten.

7) Werfen Sie jede mögliche Färbungslösung weg, deren Farbe anzeigt, dass die Lösung vermindert hat. Ein Entdeckungswert von weniger als 0,5 für Standardlösung 1 (0 ppb) zeigt Verminderung an.

8) Die optimale Reaktionstemperatur ist 25℃, und die Entdeckungsempfindlichkeit und Od-Wert ändern, wenn die Temperatur zu hoch oder zu niedrig ist.

 

9. Lagerung und Verfallsdatum

 

Lagerung: Speicher bei dem ℃ 2-8, nicht eingefroren.

Verfallsdatum: 12 Monate; Herstellungsdatum ist auf Kasten.

Anmerkung: Wenn die Vakuumverpackung von microplate Durchsickern hat, ist sie noch gültig zu verwenden, beeinflußt nicht das Testergebnis, ist sich zu entspannen, um zu verwenden.

 

 

Q1: Wann wird es versendet?
A1: Wir versenden die Waren für Sie so bald wie möglich innerhalb 7 Werktage, nachdem wir die Zahlung empfangen haben. (Im Falle der externen Faktoren wie der Epidemie, die Lieferung möglicherweise wird verzögert)

 

Q2: Stützt es OEM/ODM?
A2: Es kann gestützt werden, aber die spezifische Quantität muss mehr als 100.000 Stücke sein, die für kundengebundene Produkte bequem ist.

 

Q3: Wie tut Ihre Fabrik im Hinblick auf Qualitätskontrolle?
A3: Wir haben national ISO9001 und ISO13485 bestätigt. Unser Produktionsverfahren passt sich an Standardabläufe an, um optimale Produktqualität sicherzustellen.

 

Q4: Wie man Kundendienst erbringt?
A4: Wir erbringen Berufstechnischen on-line-Kundendienst. Wir können Sie mit Einzel- Anleitung über Video, Telefon, etc. versehen.

 

Q5: Was ist die Zahlungsmethode?
A5: Wir empfangen Zahlung durch T/T.

 

Q6: Wie man versendet?
A6: Wählen Sie den besten Versandart für Sie, indem Sie Zitate von unseren vielen kooperativen Fördermaschinen und vom auch Schiff entsprechend Ihren Anforderungen erhalten.